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發(fā)布時間:2017-03-01 18:14  
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如何根據(jù)優(yōu)缺點選擇合適的CCK-8檢測試劑盒,首先我們需要了解的是Cell Counting Kit (CCK-8) 的優(yōu)缺點,通過對各品牌的綜合比較選擇高效價比的CCK-8檢測試劑盒。
CCK-8優(yōu)缺點
CCK-8在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產(chǎn)物(Formazan)。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數(shù)量。
1、使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;2、檢測快速;
3、靈敏度高,甚至可以測定較低細胞密度;4、重復(fù)性優(yōu)于MTT;5、對細胞毒性??;
6、為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用;
7、水溶性,不需換液,尤其適用于懸浮細胞1、與MTT相比,CCK-8和XTT的價格比較貴;
8、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加
優(yōu)點
1、操作簡單,比MTT高效,產(chǎn)生水溶性的Formazan,無需用DMSO溶解;
2、由于MTS被還原后生成的甲瓚產(chǎn)物顏色較深,吸光度值變異范圍大,使測定更加敏感準確,陰/陽性的判斷也比較容易;
3、快速,作用時間2-3小時為最佳,而MTT需4小時;4、重復(fù)性好,還原產(chǎn)物穩(wěn)定
缺點
1、由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的1、試劑比較貴甲臜不溶于水,需被溶解后才能檢測,對實驗結(jié)果的準確性產(chǎn)生影響;
2、不太適合懸浮細胞活性檢測
為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細胞增殖與毒性檢測最佳選擇:
§ 如下表,CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較,結(jié)果不言而喻!
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檢測方法 |
MTT法 |
XTT法 |
WST-1法 |
CCK-8法 |
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甲臜產(chǎn)物的水溶性 |
差(需加有機溶劑溶解后再檢測) |
好 |
好 |
好 |
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產(chǎn)品性狀 |
粉末 |
2瓶溶液 |
溶液 |
1瓶溶液 |
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使用方法 |
配成溶液后使用 |
現(xiàn)配現(xiàn)用 |
即開即用 |
即開即用 |
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檢測靈敏度 |
高 |
很高 |
很高 |
高 |
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檢測時間 |
較長 |
較短 |
較短 |
最短 |
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檢測波長 |
560-600nm |
420-480nm |
420-480nm |
430-490nm |
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細胞毒性 |
高,細胞形態(tài)完全消失 |
很低,細胞形態(tài)不變 |
很低,細胞形態(tài)不變 |
很低,細胞形態(tài)不變 |
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試劑穩(wěn)定性 |
一般 |
較差 |
一般 |
很好 |
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批量樣品檢測 |
可以 |
非常適合 |
非常適合 |
非常適合 |
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便捷程度 |
一般 |
便捷 |
便捷 |
非常便捷 |
* 細胞毒性非常低,因此加入WST-8顯色后,可以在不同時間反復(fù)用酶標儀讀數(shù)從而找到最佳測定時間
* 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾(扣除空白孔即可)
如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒?
目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒有國產(chǎn)分裝或原產(chǎn)的,國產(chǎn)分裝的CCK-8試劑盒在質(zhì)量穩(wěn)定性上有不足。而原產(chǎn)于國內(nèi)實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結(jié)果,在批次之間的穩(wěn)定性上較難控制。至于原裝進口供應(yīng)CCK-8試劑盒的進口品牌并不多,就連Abcam、Thermo,Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒,而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產(chǎn)品。
作為Abbkine品牌旗下首款細胞分析旗艦產(chǎn)品,Cell Counting Kit (CCK-8),Abbkine研發(fā)工程師為其傾注了大量的投入,不斷摸索優(yōu)化最佳的配方,每一份努力只為讓科研工作者更加簡單,高效,穩(wěn)定地獲取珍貴的科研數(shù)據(jù)。
任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。
《【CCK-8】細胞增殖/毒性檢測試劑盒綜合對比》
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品牌(規(guī)格) |
Abbkine |
Sigma |
Dojindo |
|
100次 |
200 元 |
703.17 元 |
350 元 |
|
500次 |
640 元 |
2779.92 元 |
890 元 |
|
2000次 |
2050 元 |
13899.6 元(3000次) |
—— |
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10000次 |
7180 元 |
—— |
8380 元 |