蛋白質(zhì)結(jié)晶方法

結(jié)晶方法(Crystallization Techniques)1.1.1 分批結(jié)晶(Batch Crystallization) 這是老的簡單的結(jié)晶方法，其原理是同步地在蛋白質(zhì)溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達到一個高過飽和狀態(tài)。幸運的話，不需進一步處理即可在過飽和溶液中逐漸長出晶體。一個用于微分批結(jié)晶的自動化系統(tǒng)已被Chayen等人設計出（1991，1992），其微分批方法中，他們在1-2μl包含蛋白質(zhì)和沉淀劑的液滴中生長晶體。液滴被懸浮在油（如石蠟）中，油的作用是作為封層以防止蒸發(fā)，它并不干擾普通沉淀劑，但是干擾能溶解油的(Chayen, 1997; see also Chayen, 1998)。

普通蛋白結(jié)晶板

在普通24孔板的基礎(chǔ)上發(fā)展出來用于結(jié)晶學研究。透明的PS材料，平整無變形的底提供了優(yōu)異的光學性能?？拙壨怀鲇诎迕妫瑴p少孔間污染的風險。在“沉滴”（Sitting Drop）中，需要用到“微橋”（Micro-Bridges）,結(jié)晶過程中或之后，“微橋”可以轉(zhuǎn)移到另外一個孔?？捎肰IEWseal?（676070）密封，也可以用蓋玻片通過硅油密封每一孔。

用于油下結(jié)晶（Microbatch）,梯形的孔形可將樣品溶液集中于孔*，平的底部可在顯微鏡下觀察結(jié)晶的生長。

蛋白結(jié)晶板作用

隨著人類基因組測序計劃的完成 ,鑒定細胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達,結(jié)構(gòu),功能及相互作用方式等成為后基因組時代的主要目標之一.為此 ,需要高通量的蛋白質(zhì)組學研究的技術(shù)和方法.近年來出現(xiàn)的表面增強激光解吸 /電離，蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是一種操作簡單 ,方便快捷 ,樣本需要量少 ,敏感性高 ,特異性強的高通量的研究蛋白組學的方法 ,在蛋白質(zhì)功能分析,標志物篩選,研發(fā)等方面具有廣泛的應用前景。

蛋白結(jié)晶板使用

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)品的主要組分,其含量測定在水產(chǎn)品加工及研究等方面應用極為廣泛.目前,各蛋白含量快速測定方法通常是在試管中進行反應并應用分光光度計測定,其操作過程較繁瑣,分析大批量樣品時效率低,上述缺點在高通量篩選、檢測等場合尤為突出.為了克服該不足,實現(xiàn)蛋白含量的快速高通量測定,本研究基于Folin-酚法,利用96孔板作為反應器并配合比色,建立了一種蛋白含量測定的微孔板方法并評價其合理性.該法測得樣品的蛋白含量與常規(guī)法結(jié)果無顯著性差異,反應在30-90 min顯色穩(wěn)定,標準曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9922,標準偏差范圍為0.07%-0.78%,檢測限為10 μg.與常規(guī)法相比,微孔板法保持了Folin-酚法的準確性及穩(wěn)定性,同時具有通量高、節(jié)省樣品、試劑及測定時間等優(yōu)點,在蛋白高通量快速測定方面更具優(yōu)勢。