低溫生物菌種——菌種分離方法介紹

孢子分離又可分為以下幾種方法：

( 1 ）褶上涂抹法：選取新鮮、健壯、未開傘、未裂破的子實(shí)體，洗凈后用75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養(yǎng)基一起放入接種箱內(nèi)，經(jīng)熏蒸消毒12 ～ 24 小時(shí)，再按無菌操作技術(shù)將接種環(huán)在子實(shí)體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線接種，，后置于25 ～ 28 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可得純菌種。

( 2 ）孢子印采集法：取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經(jīng)24 小時(shí)后，便落下孢子，形成印痕（即孢子?。?。然后，用接種環(huán)或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養(yǎng)基上，進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，可得純菌種。

( 3 ）孢子收集器采集法：孢子收集器由玻璃鐘罩、培養(yǎng)皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內(nèi)先墊襯4～6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養(yǎng)皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養(yǎng)皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個(gè)孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內(nèi)滅菌2小時(shí)。

孢子收集器滅菌消毒后，放入無菌室或無菌箱內(nèi)。然后，用小刀割取1 塊4～5 厘米大小的子實(shí)體，插在收集器內(nèi)的三角架頂上（若無孢子收集器，也可用培養(yǎng)皿代替）。再置于溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)24 小時(shí)，培養(yǎng)皿中便可見到白色粉狀物，此即為孢子。此時(shí)，可將孢子收集器再移至接種箱內(nèi)，取出培養(yǎng)皿，蓋好，并在培養(yǎng)皿內(nèi)加入10 ～ 20 毫升的無菌水，使孢子散于本中，成為孢子懸浮液。然后，再用無菌打針筒或吸管吸取孢子懸浮液，接種于試管斜面培養(yǎng)基上，每管注2 ～ 3 滴。置于24 ～ 26 ℃溫度下培養(yǎng)5 ～ 7 天，培養(yǎng)基上便可長(zhǎng)出白色菌落。待菌落直徑有0 . 5 厘米時(shí)，選健壯的菌落，再移接于另一試管的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。當(dāng)白色菌絲長(zhǎng)滿試管時(shí)，便得純菌種。

低溫生物菌種——常用菌種介紹

固氮菌

固氮菌屬于細(xì)菌的一科。菌體桿狀、卵圓形或球形，無內(nèi)生芽孢，革蘭氏染色陰性。好氧，厭氧，兼性厭氧均有，有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型，能固定空氣中的氮素。包括固氮菌屬、氮單孢菌屬、拜耶林克氏菌屬和德克斯氏菌屬。固氮菌肥料多由固氮菌屬的成員制成。氮是植物生長(zhǎng)不可缺少的物質(zhì)，是合成蛋白質(zhì)的主要來源，固氮菌擅長(zhǎng)從空中取氮，它們能把空氣中植物無法吸收的氮?dú)廪D(zhuǎn)化成氮肥，源源不斷地供植物享用。自生固氮微生物是指在土壤中能夠利用的是土壤中的腐殖質(zhì)獨(dú)立進(jìn)行固氮的微生物，其中，多數(shù)是一類叫做自生固氮菌的細(xì)菌。經(jīng)過兩三天的培養(yǎng)，成對(duì)的菌體呈“8”字形排列，并且外面有一層厚厚的莢膜。自生固氮菌中，人們應(yīng)用得較多的是圓褐固氮菌(Azotobocter chroococcum）。圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力，并且能夠分泌生長(zhǎng)素，促進(jìn)植株的生長(zhǎng)和果實(shí)的發(fā)育，因此，將圓褐固氮菌制成菌劑，施用到土壤中，可以提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。

地衣芽孢菌

提高作物抗病、抗寒、抗旱能力；增加土壤養(yǎng)分、改良土壤結(jié)構(gòu)、提高化肥利用率；促使土壤中的有機(jī)質(zhì)分解成腐殖質(zhì)，刺激作物生長(zhǎng)。促進(jìn)作物生長(zhǎng)、成熟、降低成本、增加產(chǎn)量、提高收入；有一定的固氮、解磷、解鉀作用。

生物菌種的特點(diǎn)

調(diào)節(jié)生命活動(dòng)，增產(chǎn)增收：菌群中的膠凍樣芽孢菌、側(cè)孢芽孢菌、地衣芽孢菌等有益菌可促進(jìn)作物根系生長(zhǎng)，須根增多。有益微生物菌群代謝產(chǎn)生的植物內(nèi)源酶和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑經(jīng)由根系進(jìn)入植物體內(nèi)，促進(jìn)葉片光合作用，調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)元素往果實(shí)流動(dòng)，膨果增產(chǎn)效果明顯。與施用化肥相比，在等價(jià)投入的情況下可增產(chǎn)15%—30%。