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發(fā)布時間:2020-12-10 07:46  

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豬流行性腹瀉病毒和非洲病毒都具有在豬源原料中存活的能力;然而,作用機制目前尚不清楚。根據(jù)應(yīng)對流行性腹瀉病毒的經(jīng)驗,在不影響動物性能和飼料成本的情況下,替換原料的可行性使得很多生產(chǎn)者不再使用豬源原料。研究表明熱工過程可以殺滅病毒(如流行性腹瀉病毒),但這只能作為緊急緩解措施,因為這要求產(chǎn)品在干燥和運輸過程中必須不存在交叉污染。廣州勱博--屠宰場核酸提取純化一般情況下,高溫消毒時,60℃就可以將多數(shù)病原殺滅,但汽i油噴燈溫度達幾百度,噴燈火焰一掃而過,也不會殺滅病原,因時間太短。如果生產(chǎn)者認(rèn)可排除豬源原料是可行的,那么還應(yīng)該考慮到那些間接的豬源原料,像添加劑、基礎(chǔ)混合物和那些可能源于豬源的動物蛋白或脂肪等。

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首先,養(yǎng)豬場(戶)真正了解所使用的飼料原料的供應(yīng)鏈非常重要。包括:從誰那里購買了原料?他們又從哪里買到?在運輸中是否與其他原料混雜或混合?每個中轉(zhuǎn)地點的生物安全政策是什么?這些對于正確評估原料攜帶外來動物疾病的風(fēng)險非常重要。其次,飼料廠要注重生物安全。在不使用時蓋住接收坑,有效地控制害蟲,防止灰塵收集系統(tǒng)中的灰塵再循環(huán)回到飼料中,并管理好整個工廠的人員移動。后,養(yǎng)豬場和飼料廠要考慮監(jiān)測環(huán)境,以實現(xiàn)生物安全合規(guī)性。這兩個發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的運用。環(huán)境監(jiān)測在人類食品和寵物食品行業(yè)已經(jīng)成為常規(guī)舉措,可以幫助人們發(fā)現(xiàn)生物安全計劃中的薄弱環(huán)節(jié)。


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一、充分認(rèn)識養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲排查的重要意義。強化養(yǎng)殖環(huán)節(jié)非洲排查,是當(dāng)前疫情防控的關(guān)鍵措施,是及時發(fā)現(xiàn)和消除風(fēng)險的重要手段,有利于非洲i疫情“早發(fā)現(xiàn)、早報告、早處置”,有利于降低運輸、屠宰、生產(chǎn)加工等下游環(huán)節(jié)疫情傳播風(fēng)險。PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。二、鼓勵規(guī)模豬場和種豬場開展非洲自檢。鼓勵規(guī)模豬場、種豬場配置檢測儀器設(shè)備,規(guī)范使用經(jīng)我部批準(zhǔn)或經(jīng)中國動物疫病預(yù)防控制中心比對符合要求的檢測方法,自行開展非洲檢測。

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臨床上非洲真正感i染方式往往是通過豬與豬、豬與環(huán)境等直接接觸感i染非洲,即自然感i染。自然感i染實驗結(jié)果顯示,非洲自然感i染情況下,唾液可以早于血液3~20天檢測出非瘟病毒,便于早期篩查!。豬群一旦出現(xiàn)不吃料、減料、輕微發(fā)熱等疑似發(fā)病癥狀,可立即采集豬的唾液、肛腸拭子等混檢,有助于疫情的提早發(fā)現(xiàn)。廣州勱博--博日養(yǎng)豬場全自動核酸提取純化系統(tǒng)實時熒光定量PCR的基本原理:理論上,PCR過程是按照2n(n代表PCR循環(huán)的次數(shù))指數(shù)的方式進行模板的擴增。如果在血液中檢測到了非洲病毒,說明豬場很有可能已經(jīng)較大面積感i染非洲病毒。


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核酸的提取和純化是法醫(yī)DNA物證檢驗的關(guān)鍵技術(shù)之一,目前實驗室i常用的方法包括核酸純化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系統(tǒng),磁珠法由于操作簡便、快速,能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動化,因此成為目前法醫(yī)DNA實驗室核酸提取純化的主要手段。短距離可經(jīng)空氣傳播、污染的飼料、泔水、剩菜及肉屑、欄舍、車輛、器具和衣服等均可間接傳播本病。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過程中會造成核酸的斷裂和損失,因此在疑難檢材的檢驗過程中,存在PCR擴增失敗, DNA檢驗不成功的情況。

對豬場實行非瘟檢測,并不是說要每天/每次都要進行檢測,而是基于豬場各區(qū)域/途徑的風(fēng)險程度制定合適的檢測頻率,高風(fēng)險區(qū)域檢測頻率相對而言要高些,如引種/車輛/精i液,建議每次采樣檢測,采購飼料/物資產(chǎn)品,建議先試用并隔離做檢測,其余定期監(jiān)測,檢測頻率可按每月或每周進行,具體可根據(jù)本場實際情況而定,可按照場內(nèi)所劃分的管理單元格進行全i方位的篩選,從而降低疾病傳入風(fēng)險。廣州勱博--養(yǎng)殖場核酸提取純化在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進入指數(shù)期、線性期和最終的平臺期,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點上來檢測PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板最i初的含量。