色譜分離效果很大程度上取決于色譜填料性能，色譜技術(shù)重大進(jìn)步往往是隨著新的分離材料的出現(xiàn)而推進(jìn)的。為了滿足日益增長(zhǎng)的快速、高l效色譜分離和分析性能的要求，尤其是隨著色譜分離分析應(yīng)用領(lǐng)域越來(lái)越廣，分離效率要求越來(lái)越高，樣品組分越來(lái)越復(fù)雜，對(duì)色譜柱選擇性及分辨率提出越來(lái)越高的要求。新型色譜填料及色譜分離模式被不斷開(kāi)發(fā)出來(lái)以滿足各種應(yīng)用需求：從有機(jī)化合物分離分析中比較常用的反相色譜，到無(wú)機(jī)離子分析檢測(cè)的離子色譜，再到手性藥l物拆分的手性色譜，到多糖分離分析色譜，再到蛋白抗l體分析檢測(cè)用各種生物色譜技術(shù)被不斷開(kāi)發(fā)出來(lái)。色譜柱種類(lèi)越來(lái)越多，適用范圍越來(lái)越廣，對(duì)色譜柱性能的要求也越來(lái)越高。色譜柱填料的性能主要取決于其基質(zhì)組成、形貌、粒徑大小、粒徑分布、孔徑大小、孔徑分布、比表面積、表面功能基團(tuán)等因素。色譜填料性能往往是隨著這些材料制備技術(shù)的進(jìn)步而提升。

硅膠表面修飾和功化制備技術(shù)發(fā)展歷程：

硅膠基球是硅膠色譜填料發(fā)展的基礎(chǔ)，硅膠性能的改善是源于對(duì)硅膠顆粒形貌結(jié)構(gòu)、粒徑大小、粒徑分布、孔道結(jié)構(gòu)、比表面積等的控制能力提高。硅膠表面改性和功能化是色譜分離模式賴以建立的基礎(chǔ)，其功能基團(tuán)性質(zhì)、種類(lèi)、及密度會(huì)影響其分離的選擇性。隨著HPLC 應(yīng)用領(lǐng)域越來(lái)越廣，硅膠表面功能化種類(lèi)也越來(lái)越多，且硅膠基球表面富含具有反應(yīng)活性的硅羥基，因此可以通過(guò)化試劑與表面硅羥基反應(yīng)引入不同的功能基團(tuán)，以制備不同分離模式的色譜填料。

SEC色譜填料SEC色譜分離模式與其它所有分離模式很大的不同就是樣品分子與固定相表面配基之間不存在相互作用。SEC 對(duì)樣品組分分離只取決于填料的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關(guān)系，與流動(dòng)相的性質(zhì)沒(méi)有直接的關(guān)系。不同大小的溶質(zhì)分子可以通過(guò)擴(kuò)散遷移和滲透到不同大小的孔洞里。小分子，可以進(jìn)入更多更深的孔道里，因此小分子駐保留時(shí)間長(zhǎng)，洗脫體積大，而大分子會(huì)被小孔排阻在外，只能進(jìn)入大孔孔洞中，因此其經(jīng)過(guò)柱床的路徑比較短，會(huì)先從柱子中洗脫出來(lái)，從而實(shí)現(xiàn)具有不同分子大小樣品的分離。