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發(fā)布時間:2021-05-08 11:46  
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{微生物檢測}微生物接種

4、澆混接種
該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45℃左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達到稀釋的目的。待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長出單個的微生物菌落。
5、涂布接種
與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長出單個的微生物的菌落。
6、液體接種
從固體培養(yǎng)基中將菌洗下,倒入液體培養(yǎng)基中,或者從液體培養(yǎng)物中,用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中,或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中,都可稱為液體接種。
7、注射接種
該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi),如人或其它動物中,常見的yimiao預(yù)防接種,就是用注射接種,接入人體,來預(yù)防某些疾病。
8、huoti接種
huoti接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,因為病毒必須接種于活的生物體內(nèi)才能生長繁殖。所用的huoti可以是整個動物;也可以是某個離體活組織,例如猴等;也可以是發(fā)育的雞胚。接種的方式是注射,也可以是拌料喂養(yǎng)。
注:有所接種必須無菌操作
培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后,用經(jīng)過滅菌的工具(如接種針和吸管等)在無菌條件下接種含菌材料(如樣品、菌苔或菌懸液等)于培養(yǎng)基上,這個過程叫做無菌接種操作。在實驗室檢驗中的各種接種必須是無菌操作。
(1)接種滅菌 (2)開啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好棉塞。
抑菌效力-培養(yǎng)基
培養(yǎng)基的制備
1.胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基
胰酪胨17.0克
氯化鈉5.0克
大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克
磷酸氫二鉀2.5克
葡萄糖(一水合)2.5克
水1000mL
除葡萄糖外,取上述成分,混合,微溫溶解,濾過,調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入葡萄糖,分裝,滅菌。
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基置 20~25℃培養(yǎng)。
2. 胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基
胰酪胨15.0克
大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克
瓊脂15.0克
水1000ml
除瓊脂外,取上述成分,混合。微溫溶解,調(diào)節(jié) pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,搖勻,分裝,滅菌。
3.沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基照微生物限度檢查法(附錄ⅩⅢ C)制備。
2.薄膜過濾法
除另有規(guī)定外,按計數(shù)方法適用性試驗確認的方法進行供試液制備。就是說這種微生物在培養(yǎng)時,需要有氧氣加入,否則就不能生長良好。取相當(dāng)于1g、1ml或10c㎡供試品的供試液,若供試品所含的菌數(shù)較多時,可取適宜稀釋級的供試液,照方法適用性試驗確認的方法加至適量稀釋液中,立即過濾,沖洗,沖洗后取出濾膜,菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
培養(yǎng)和計數(shù) 培養(yǎng)條件和計數(shù)方法同平皿法,每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超100cfu。
菌數(shù)報告規(guī)則 以相當(dāng)于1g、1ml或10c㎡供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù);若濾膜上無菌落生長,以<1報告菌數(shù)(每張濾膜過濾1g、1ml或10c㎡供試品),或<1乘以zui低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。