ELISA試劑盒的制備方法

包括以下步驟：

1)抗原表位的計算機篩選；

2)抗原的制備；

3)采集；

4)間接ELISA方法的建立；

5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證；

6)試劑盒的穩(wěn)定性驗證；

7)對屠宰場進(jìn)行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預(yù)防、控制豬戊病毒的流行和阻斷戊病毒由豬向人傳播。

ELISA試劑盒的操作方法——間接法

以下是北京中檢維康生物技術(shù)有限公司為您一起分享的內(nèi)容，北京中檢維康生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒，歡迎新老客戶蒞臨。

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二（抗）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.然后用DDW洗滌。

其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時，常常會先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。

Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

現(xiàn)白板，陽性對照不顯色 

1  顯色液變質(zhì) 更換新的顯色液

2  洗滌液配制有誤 請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制

3  未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 注意不要漏加

4  終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽

5  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法錯誤/或標(biāo)準(zhǔn)品有問題 請按照說明書所示配置說明書，注意單位和稀釋倍數(shù)

6  不同試劑盒或不同批號的試劑混用 建議使用同批次試劑盒。不能混用不同試劑盒或不同批號的試劑。