制備方法編輯包括以下步驟：1)抗原表位的計算機篩選；2)抗原的制備；3)的采集；4)間接ELISA方法的建立；5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證；6)試劑盒的穩(wěn)定性驗證；7)對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性合格、重復性好。應用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒，適用于大批量發(fā)病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



加酶標：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。4.　加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。5.　終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ ”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板）。

6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

哺乳動物細胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色，并且由兩種亞單位構成，一種含有銅，另一種含有鋅（Cu/Zn-SOD）。線粒體和細菌SOD為紅紫色并含有錳（Mn-SOD）。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測定SOD的活性，研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法，其中，NBT的間接法為常用，因為它很方便。但是，NBT法有幾個缺點，例如生成的染料水溶性差，而且會和氧化酶的還原型發(fā)生反應。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測，但它和超氧化物反應過于劇烈，不能測定低水平的SOD。