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發(fā)布時間:2021-09-06 22:16  

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等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析等后續(xù)實驗的結果。

當前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價較高,單次實驗費用花費太大,對精度要求不高的實驗沒有必要購買,當然還有其它的進口試劑盒,但是均存在價格高、訂貨周期長的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時候,要從國外發(fā)貨,會等很長一段時間)。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價格比進口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯,還可以。

當然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯,如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復雜一些。



重組酶聚合酶擴增技術(RPA)是2006年由英國科學家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復印,恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增,既可以擴增DNA,也可以擴增RNA。RPA技術具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點,是目前很有望替代PCR技術的核酸等溫擴增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應用前景。

相對來說RPA是很好的恒溫擴增法,可在較低溫下恒溫擴增,不需要復雜儀器設備,操作簡單、反應時間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物



目前市場上各家生物企業(yè)研發(fā)出的核酸檢測試劑盒已經(jīng)超過100種,但由于缺乏RNA標準物質(zhì),無法對檢測方法進行量值傳遞和對試劑盒檢測結果的準確度進行評價,好的國產(chǎn)試劑盒競爭力也無法得到證明。為此,急需研制RNA標準物質(zhì)來評價這些病毒核酸檢測試劑盒的質(zhì)量和準確度,為試劑盒檢測結果的判定提供準繩。