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發(fā)布時間:2020-12-31 07:34  
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廣州碩譜生物科技有限公司氨丙基SPE柱規(guī)格
離子交換固相萃取小柱方法開發(fā)中需要注意的問題。
離子交換固相萃取適用于可解離成帶電離子的化合物,其機理是利用帶電荷的目標化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。廣州碩譜生物科技有限公司氨丙基SPE柱規(guī)格對于一根常用的C18柱,拿到一根新柱的時候應(yīng)該怎樣進行活化及維護。樣品基質(zhì)可以是極性的,如水溶液,也可以是非極性的有機溶液,但在實際應(yīng)用中以水溶液較多,包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。
常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型
C18柱
C18是目前使用zui多的一種SPE柱,根據(jù)2003年的一項統(tǒng)計,在所有使用
的SPE柱中,C18柱占了56%左右。C18柱的主要官能團是十八烷基( octade-cyl),其主要作用力是非極性,第二作用力是極性、陽離子交換。在所有鍵合硅
膠SPE吸附劑中,C18柱的非極性吸附能力zui強。因此,強非極性化合物被C18
吸附后可能較難洗脫。C18難吸附極性非常強的分子,如碳水化合物( carbohy
-drates).C18一般被當作zui沒有選擇性或通用型的吸附劑,因為絕大多數(shù)有機分子或多或少含有非極性基團,C18可以從水溶液中吸附這些有機化合物。因此C18對于同時分離不同結(jié)構(gòu)的化合物時較為適用。廣州碩譜生物科技有限公司氨丙基SPE柱規(guī)格固相萃取小柱的選擇固相萃取柱的種類很多,具體實驗工作中,需根據(jù)分析對象、檢測手段及實驗室條件合理選擇合適填料、合理規(guī)格的固相萃取柱。由于C18的選擇性較低,其zui終萃取物往往沒有其他選擇性高的填料那么干凈。在蛋白質(zhì)純化中,C18柱是優(yōu)1秀的除鹽工具,因為樣品中的鹽在C18柱上沒有保留。C18的極性副作用力比其他鍵合硅膠SPE吸附劑低許多,主要是碳鏈較長的原因。
固相萃取,是從萃取原理發(fā)展起來的,色譜和萃取一樣使用分配比的概念,所以很難理解。固相萃取同樣采用柱狀萃取法,外形像柱色譜,固定相又是采用化學鍵合物質(zhì),可以說是小型化學鍵合固定相色譜。針對這個問題,月旭推出了離子交換固相萃取硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì)小柱。由于該過程較短,不適合色譜法進行復雜混合物的分離,但可以非常方便地從復雜混合物中萃取一到兩個目標物。在使用時應(yīng)注意:色譜法為保證色層穩(wěn)定,不允許流動相斷流,在固定相中產(chǎn)生氣泡;與固相萃取相反,目標物保留在固定相中,也不管色層穩(wěn)定與否,要求先將流動相打空,然后才能進入后流動相,準確地說,是洗脫劑。
固相萃取柱該用什么溶劑進行活化、淋洗和洗脫
1、活化:固相萃取柱活化的目的有兩個,di一個目的是為了浸潤填料、以便樣品溶液能流過固相萃取柱;第二個目的是為了清洗固相萃取柱上面的干擾雜質(zhì)以及溶劑殘留。
2、上樣:讓樣品溶液流過固相萃取柱,讓填料吸附目標物質(zhì)。一般流速不能太快,否則吸附不完全,會導致回收率低下。
3、淋洗:需要選擇合適溶劑,既不會把吸附在固相萃取柱填料上面的目標產(chǎn)物洗掉,又能清洗掉一些干擾雜質(zhì),這個的選擇也是根據(jù)既有方法來的,沒有統(tǒng)一標準。