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原位雜交技術(shù)電話(huà) 武漢思特進(jìn)

發(fā)布時(shí)間:2021-08-24 13:11  

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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。此外,原位雜交還是顯示細(xì)胞亞群分布和動(dòng)向及病原微生物存在方式和部位的一種重要技術(shù)。





基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。3.固定液常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。





探針的標(biāo)記物可以是性同位素,也可以是非性生物素和半抗原等,性同位素中,3H和35S為常用,3H標(biāo)記的探針半衰期長(zhǎng),成像分辨率高,便于定位,缺點(diǎn)是能量低,35S標(biāo)記探針活性較高,影像分辨率也較好,而32P能量過(guò)高,致使產(chǎn)生的影像模糊,不利于確定雜交位點(diǎn)。尤其當(dāng)待檢標(biāo)本為陰性時(shí),陽(yáng)性對(duì)照片呈陽(yáng)性反應(yīng)可排除待檢標(biāo)本假陰性的可能。


武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開(kāi)展各類(lèi)動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




同其他的生物技術(shù)一樣,原位雜交技術(shù)在其發(fā)展與應(yīng)用的過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題,但隨著原位雜交技術(shù)的不斷改進(jìn)與完善以及檢測(cè)手段的改進(jìn),原位雜交技術(shù)的優(yōu)越性越來(lái)越突出,其應(yīng)用也會(huì)更加廣泛。,1986),在植物上早應(yīng)用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等2001。

熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH)技術(shù)問(wèn)世于20世紀(jì)70年代后期,其基本原理是利用標(biāo)記了熒光素的核酸作為探針,按照堿基互補(bǔ)原則,與待檢樣本中與之互補(bǔ)的核酸經(jīng)過(guò)變性-退火而形成雜交雙鏈核酸,通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)和分析。



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取材與標(biāo)本固定

1. 取材 對(duì)于原位雜交所用的材料要盡可能新鮮,為了防止RNA的降解,取材要迅速,取材后要盡快固定或冷凍保存。

2.固定 進(jìn)行原位雜交的組織或細(xì)胞必須經(jīng)過(guò)固定處理,固定的目的是為了①保持細(xì)胞形態(tài)原有結(jié)構(gòu);②保存細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA的水平;③使探針易于進(jìn)入細(xì)胞或組織內(nèi)。

3.固定液 常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。這些固定液都有不同的優(yōu)缺點(diǎn)因此要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,選擇的固定液。

4.固定方法 組織標(biāo)本取材后,迅速放入固定液中2~4h,取材組織大小為1cm×1cm×0.5cm,不宜太大。必要時(shí),動(dòng)物組織可進(jìn)行灌流固定,然后將組織按要求取材放入20%蔗糖中,4℃過(guò)夜,次日可行冰凍切片。