廣州碩譜生物科技有限公司NH2固相萃取柱類型

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動(dòng)相極性的分離模式。

常見(jiàn)的極性固定相有：硅膠，氧化鋁，弗羅里硅土及含有qing基（CN）、氨基（NH2）、二醇基（2OH）的鍵合硅膠。

正相模式下，溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高，它們的洗脫強(qiáng)度也逐漸增大。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標(biāo)物洗脫，選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下zui大限度地洗脫干擾物，所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標(biāo)物。

為何 SPE小柱操作強(qiáng)調(diào)流速？

SPE小柱填料充填壓實(shí)后，形成柱床，當(dāng)溶劑流過(guò)小柱時(shí)，速度過(guò)快會(huì)產(chǎn)生兩個(gè)問(wèn)題：一是對(duì)粘結(jié)相填料而言，由于流速過(guò)快，使其不能充分浸潤(rùn)舒展，從而使其保持活性降低；二是流速過(guò)快會(huì)使小柱形成溝槽，使其未充分浸潤(rùn)，從而降低吸附填料與樣品的接觸面積，影響目標(biāo)物質(zhì)的傳質(zhì)過(guò)程，從而降低回收率。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。當(dāng)柱流速度為0.5-3.0 mL/min時(shí)，通常不會(huì)產(chǎn)生溝槽效應(yīng)，且溝槽的形成與柱床高度有關(guān)；當(dāng)柱流速度為0-3.0 mL/min時(shí)，由于橫截面積較大，柱床較低，溝槽效應(yīng)較小，因而適用于高流速條件下的大體積水樣的富集；當(dāng)離子交換和特定吸附作用時(shí)，填料和分析靶物的作用時(shí)間較長(zhǎng)，控制流速可保證良好的保留效果。

固相萃取(Solid Phase Extraction，簡(jiǎn)稱 SPE)是20世紀(jì)70年代中期發(fā)展起來(lái)的樣品前處理技術(shù)，其用途廣泛，并日益受到人們的歡迎。廣州碩譜生物科技有限公司NH2固相萃取柱類型SPE小柱的填料裝實(shí)后，當(dāng)通過(guò)小柱的流速較低時(shí)，液體是以層流的方式通過(guò)填料層，將填料層浸潤(rùn)充分，濕潤(rùn)的液面截層逐級(jí)向前推進(jìn)，見(jiàn)附圖。按吸附劑填料和吸附機(jī)理的不同，主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱，采用正相、反相固相萃取小柱，主要用于萃取分離極性和非極性化合物，但對(duì)某些帶電物質(zhì)(離子化合物)的萃取回收率較低，如C18填料的固相萃取小柱，當(dāng)目標(biāo)化合物為離子態(tài)時(shí)，C18對(duì)該化合物的影響較小。針對(duì)這個(gè)問(wèn)題，月旭推出了離子交換固相萃取硅膠基質(zhì)和聚合物基質(zhì)小柱。

固相萃取操作中常見(jiàn)的問(wèn)題

凈化效果不理想

凈化模式的改進(jìn)通常而言采用保留目標(biāo)化合物的模式比保留雜質(zhì)的模式凈化效果好，如果正在分析的項(xiàng)目為某一種或某一類化合物分析，zui好是采用保留目標(biāo)化合物的凈化模式；因?yàn)楣滔噍腿∥絼┚哂胁煌墓δ芑鶊F(tuán)，所以可以吸附和保留特定化合物于固相萃取柱。舉一個(gè)簡(jiǎn)單的例子，同樣是分析蔬菜中的多菌靈(一類堿性農(nóng)1藥)，使用陽(yáng)離子交換柱可以專一性地保留這些農(nóng)1藥，使它們基本與干擾物完全分離，而使用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作僅能把主要的干擾物除去，仍有較多干擾物存留。

另外，如果不止一種SPE柱可用于目標(biāo)化合物的凈化時(shí)，應(yīng)挑選選擇性好的吸附劑；選擇性方面，離子交換＞正相＞反相。