大鼠腦缺血再灌注模型

造模方法

大鼠麻zui仰臥固定于恒溫手術臺上。(2)模型特點本模型病理表現(xiàn)為進行性肺泡腔擴大、肺功能減退，造模12個月后即使停止給予動物煙霧暴露環(huán)境，模型動物肺泡腔的病理學改變?nèi)钥沙蔬M行性發(fā)展，不能恢復正常。暴露頸總動脈頸（CCA），分離頸內(nèi)動脈（ICA）和頸外動脈（ECA）。CCA近心端結扎并另備線，ICA遠端放置微型動脈夾，在CCA靠近分叉處插入魚線，即線栓由頸內(nèi)動脈分叉處計長度為1.85±0.05cm，說明絲線頭端己到達ICA分支MCA以和大腦前動脈（ACA）的分叉處，阻斷了同側ICA和經(jīng)ACA來自對側ICA的血供，缺血1h。

手術造模圖片

病理判定圖片

實驗動物各種體液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性實驗中， 可用吸管直接插入動物口腔或唾液腺導管抽吸唾液，此法非常簡單，但從口腔抽吸唾液會有雜質(zhì)混入。

2. 制造腮腺瘺法 在慢性實驗中,收集狗的唾液，要用手術方法將腮腺導管開口移向體外，即以腮腺導管為中心，切成一直徑約2～3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片，與周圍組織分開，穿過皮膚切口引到頰外,將帶有導管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合,腮腺分泌的唾液就流出頰外。髓磷脂特異性T細胞在外周被ji活，穿過血腦屏障進入zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)并被重新ji活，引發(fā)一系列yan癥反應，導致脫髓鞘和軸突細胞凋亡，zui終導致神經(jīng)損傷和失去功能。這種方法可以收集到較純凈的唾液。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性實驗時，先將動物，將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi),在灌胃管的出口連一，用此可收集到胃液,此法適用于狗等大型動物。如作的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發(fā)性的發(fā)生率是多少。如是大鼠,需手術剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理鹽水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，進行分析。

2. 制備胃瘺法 在慢性實驗中,收集胃液多用胃瘺法,如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。(五)社會挫敗模型具代表性的是地鼠的壓抑模型，它是人為地將雄性地鼠配對飼養(yǎng)在同一環(huán)境中。制備小胃是將動物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。應用該法，可以待動物恢復健康后，在動物清醒狀態(tài)下反復采集胃液。

(三)胰液和膽汁

在動物實驗中，主要是通過對胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。所有小鼠觀察--般情況(精神狀態(tài)、飲食、體質(zhì)量等)zhong瘤生長情況(是否成瘤。狗的胰總管開口于十二指腸降部，在緊靠腸壁處切開胰管，結扎固定并與導管相連，即可見無色的胰液流入導管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個總管，在其入腸處插管固定，并在近肝門處結扎和另行插管，可分別收集到胰液和膽汁。

有時也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。

實驗動物大、小鼠的采血方法

1、動物實驗中剪尾采血：需血量少時可用此方法。將動物固定，顯露尾部，將尾塵剪去約5mm，從尾根部向尾端部，血即從斷端流出。24h后用yi醚淺麻zui大鼠，頸部常規(guī)消毒，打開頸前正中切口，將套在雙側頸總動脈下的備用線結扎,根據(jù)實驗需要可阻斷血流10?60min。若用二棉球涂擦尾部或事先將鼠尾浸在45℃水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈，可采到較多的血，但注意二可致溶血。也可用鋒利刀片割破尾動脈或尾靜脈，讓血液自行流出，采血后，消毒，止血。如將動物取血量可更多些。小鼠每次采血約0.1ml，大鼠約0.4 ml。為了多次反復取血應盡量從鼠尾末端開始。

2、動物實驗中摘眼球采血：此法常用于鼠類大量采血。模型動物血qingT、E2和空腹血糖水平明顯升高，空腹及服糖后2h血胰島素水平顯著升高。用左手固定動物，壓迫眼球，盡量使眼球突出，右手用無鉤彎鑷子或彎止血鉗迅速摘除眼球，立即將鼠倒置，頭朝下，眼眶內(nèi)很快流出血液。一般只適用于一次采血。大部動物采血后可以存活，可采另一側眼球取血。

大鼠后眼框靜脈叢取血方法

4、動物實驗中頸靜脈或頸動脈采血：將鼠，剪去一側頸部外側被毛，作頸靜脈或頸動脈分離手術，用即可抽出所需血量。也可插入導管，反復采血。

5、斷頭采血：操作者左手拇指和食指握住鼠頸部，頭朝下，用利剪在頭頸間1/2處迅速剪動物頭部，提起動物，血液即可流入準備好的容器中。

6、心臟采血：將動物，使其仰位固定，剪去胸前區(qū)毛，消毒皮膚，在左側第3—4肋間選擇心博強處穿刺，血液借心臟跳動的力量進入。亦可在動物后，切開動物胸腔，直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟，直接用、吸管等吸血。

人卵l巢癌課鼠皮下移植瘤模型

【造模方法】

實驗動物常用BALB/c-nu/nu裸鼠，4～6周齡，雌性。移植材料常用人卵l巢癌細胞株SKOV3、OVCAR3。(二)獲得性無助模型獲得性無助是一種當大鼠接受無法控制或預知的厭惡xing刺激后，將其放在可以逃避dian擊的環(huán)境中時，呈現(xiàn)出的逃避行為欠缺的現(xiàn)象，同時可伴有如食欲減退、體重減輕、運動性活動減少、攻擊性降低等現(xiàn)象。常規(guī)培養(yǎng)人卵l巢l癌腫l瘤細胞株，收集處于對數(shù)生長期細胞，制成單細胞懸液。調(diào)整細胞濃度為5.0×10000000ml。用1ml注l射器將細胞懸液注入裸鼠肩胛背部等部位皮下，0.2ml/只。接種后每天觀察腫l瘤生長情況。