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博日養(yǎng)豬場(chǎng)核酸提取純化常用解決方案

發(fā)布時(shí)間:2020-11-16 13:51  

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廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。我們的客戶(hù)對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。在實(shí)時(shí)PCR中,反應(yīng)是在目標(biāo)的擴(kuò)增最早被監(jiān)測(cè)到時(shí)用循環(huán)中的時(shí)間點(diǎn)來(lái)描述的,而不是在PCR結(jié)束時(shí)通過(guò)目標(biāo)的累計(jì)數(shù)來(lái)描述。

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一、在動(dòng)物檢疫中對(duì)生豬及其產(chǎn)品開(kāi)展非洲病毒檢測(cè),應(yīng)當(dāng)使用我部批準(zhǔn)或經(jīng)中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心比對(duì)符合要求的檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑盒(試紙條),確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。符合要求的檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑盒(試紙條)可從中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站查詢(xún)。二、應(yīng)急期間,比對(duì)符合要求的檢測(cè)試劑盒(試紙條)可使用至2019年6月30日。根據(jù)應(yīng)對(duì)流行性腹瀉病毒的經(jīng)驗(yàn),在不影響動(dòng)物性能和飼料成本的情況下,替換原料的可行性使得很多生產(chǎn)者不再使用豬源原料。三、各地畜牧獸醫(yī)管理部門(mén)要加強(qiáng)對(duì)非洲病毒檢測(cè)試劑盒(試紙條)生產(chǎn)企業(yè)及其產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管,確保產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。


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豬肉制品加工企業(yè)在生豬產(chǎn)品原料中檢出非洲病毒核酸陽(yáng)性的,應(yīng)當(dāng)立即封存陽(yáng)性樣品的同批次原料并報(bào)告所在地市場(chǎng)監(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門(mén),并將陽(yáng)性樣品送至具有檢測(cè)資質(zhì)的單位復(fù)檢。復(fù)檢為陽(yáng)性的,企業(yè)要在當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)監(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門(mén)監(jiān)督下,按規(guī)定對(duì)同批次生豬產(chǎn)品原料進(jìn)行無(wú)害化處理,對(duì)相關(guān)場(chǎng)所進(jìn)行徹i底清洗消毒。生豬屠宰廠(場(chǎng))連接著生豬產(chǎn)銷(xiāo)等上下游環(huán)節(jié),便于“順藤摸瓜”及時(shí)發(fā)現(xiàn)和追溯潛在風(fēng)險(xiǎn)。


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一個(gè)豬場(chǎng)對(duì)進(jìn)場(chǎng)人員的衣物進(jìn)行熏蒸消毒,專(zhuān)門(mén)制作了一個(gè)消毒柜,但由于開(kāi)始設(shè)計(jì)不理想,消毒柜太大,無(wú)法進(jìn)入屋內(nèi),就放在了舍外。夏秋季節(jié)消毒沒(méi)什么問(wèn)題,但到了冬天,他們?nèi)匀辉谏嵬庋粝?,這樣的效果是很差的。廣州勱博--冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。還有的在入舍消毒池中,只是例行把水和火堿放進(jìn)去,也不攪拌,火堿靠自身溶解需要較長(zhǎng)時(shí)間,那剛放好的消毒水的作用就不確實(shí)了。

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現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明,在豬日糧中,豬流行性腹瀉病毒和其他外來(lái)病毒等能很好存活的原料包括:豆粕、酒糟、豬源蛋白質(zhì)、維生素預(yù)混料、氨化膽i堿、L-賴(lài)氨酸和DL-蛋氨酸。如果其他尚未被評(píng)估的原料符合以下標(biāo)準(zhǔn)就更有利于病毒存活:蛋白質(zhì)含量高(特別是天然蛋白質(zhì))、豬源、相對(duì)表面積較大質(zhì)量(比)、含有載體的微成分。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。值得注意的是,這些原料并非具有相同的污染風(fēng)險(xiǎn)。


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在real-time Q-PCR技術(shù)中,無(wú)論是相對(duì)定量還是標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的問(wèn)題有待解決。在標(biāo)準(zhǔn)曲線定量中,標(biāo)準(zhǔn)品的制備是一個(gè)必不可少的過(guò)程。目前由于無(wú)一統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),各個(gè)實(shí)驗(yàn)室所用的生成標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品各不相同,致使實(shí)驗(yàn)結(jié)果缺乏可比性。②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短,整個(gè)提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成。此外,用real-time Q-PCR來(lái)研究mRNA時(shí),受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄(RT)效率的限制。在相對(duì)定量中,其前提是假設(shè)內(nèi)源控制物不受實(shí)驗(yàn)條件的影響的,合理地選擇合適的不受實(shí)驗(yàn)條件影響的內(nèi)源控制物也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠與否的關(guān)鍵。

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與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比,Real-time Q-PCR的不足之處是:(1)由于運(yùn)用了封閉的檢測(cè),減少了擴(kuò)增后電泳的檢測(cè)步驟,因此也就不能監(jiān)測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物的大??;熒光定量PCR技術(shù)是在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)隨著PCR反應(yīng)的積累來(lái)實(shí)時(shí)監(jiān)控PCR反應(yīng)的進(jìn)程,并通過(guò)分析軟件對(duì)PCR的反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)分析的技術(shù)。(2)因?yàn)闊晒馑胤N類(lèi)以及檢測(cè)光源的局限性,從而相對(duì)地限制了real-time Q-PCR的復(fù)合式(multiplex)檢測(cè)的應(yīng)用能力;(3)目前real-time Q-PCR實(shí)驗(yàn)成本比較高,從而也限制了其廣泛的應(yīng)用。


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目前全世界都沒(méi)有有效的非洲i疫i苗進(jìn)行預(yù)防,現(xiàn)在有效的防控方法仍然是對(duì)非洲病毒進(jìn)行檢測(cè),根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,對(duì)發(fā)生疫情的地方嚴(yán)防死守,對(duì)疫點(diǎn)地區(qū)生豬全部撲殺,進(jìn)行無(wú)害化處理,防止疫情的擴(kuò)散。農(nóng)i業(yè)部要求豬場(chǎng)、飼料廠和屠宰廠和流通環(huán)節(jié)必須進(jìn)行非洲病毒檢測(cè)。豬場(chǎng)、飼料廠、屠宰廠和流通環(huán)節(jié)用我們的ASFV LAMP現(xiàn)場(chǎng)可視化快速檢測(cè)試劑盒對(duì)非洲病毒進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果,對(duì)發(fā)生疫情的地方嚴(yán)防死守,對(duì)疫點(diǎn)地區(qū)生豬全部撲殺,進(jìn)行無(wú)害化處理,防止疫情的擴(kuò)散。在反應(yīng)體系中加入熒光分子,通過(guò)熒光信號(hào)的按比例增加來(lái)反應(yīng)DNA量的增加,使PCR產(chǎn)物的實(shí)時(shí)檢測(cè)成為可能。從而對(duì)非洲進(jìn)行有效的防控。i大限度減少養(yǎng)殖戶(hù)經(jīng)濟(jì)損失。

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PCR檢測(cè)同熒光PCR類(lèi)似,都是使用的引物和探針以VP72編碼區(qū)域作為靶基因設(shè)計(jì),該基因研究清楚,且高度保守,即使在滅活或降解的樣品中也可檢測(cè)到已知所有22種p72病毒基因型的多個(gè)毒株。PCR檢測(cè)雖不需要熒光顯微設(shè)備,但也需要相關(guān)設(shè)備,可以代替病毒分離鑒定的一種靈敏、特異、快速非瘟檢測(cè)技術(shù)。熒光定量PCR結(jié)果可以用于定性(判斷一段序列的有無(wú)),也可以用于定量(確定DNA拷貝數(shù)),即qPCR,而常規(guī)PCR只能做半定量。