將細胞凍存管由液態(tài)氮中取出，置于室溫回溫，不用水浴溶解。此時可準備新鮮培養(yǎng)   基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。在生物安全柜內，直接以少量培養(yǎng)基反復沖融，使細胞團塊化凍。 先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細胞。 倒去上清液，重懸細胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

支原體污染細胞污染可分為細菌、霉菌、酵母菌、支原體污染，其中支原體污染發(fā)生的概率>50%。支原體(Mycoplasma) 是小的原核生物，約0.1-0.3μm，可穿透0.22-0.45 μm 過濾膜 （BI經(jīng)過3次0.1μm濾膜并且檢測支原體)。支原體污染棘手的原因之一是沒有如其他污染源“立即可辨”的現(xiàn)象，支原體污染侵襲細胞但是并不一定致死。如果您的細胞出現(xiàn)如下狀態(tài)：增殖變慢、形態(tài)變差、培養(yǎng)液變黃但是沒有渾濁，說明您的細胞可能正遭受支原體的摧殘！

如何避免細胞抱團？細胞生長密度不要太高，70%－80％就好（細胞剛剛基本成單層細胞，沒有出現(xiàn)成層生長），這樣細胞抱團的幾率就大大減少了。如果細胞已經(jīng)長成集落，可先將細胞低密度傳代，第二天再消化傳代，這樣連續(xù)傳三次，細胞抱團的就越來越小，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時間能將細胞逐漸傳成單個的。用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞。

肌紅蛋白（myoglobin）:是由一條肽鏈和一個血紅素輔基組成的結合蛋白，是肌肉內儲存氧的蛋白質，它的氧飽和曲線為雙曲線型。血紅蛋白（hemoglobin）：是由含有血紅素輔基的4個亞基組成的結合蛋白。血紅蛋白負責將氧由肺運輸?shù)酵庵芙M織，它的氧飽和曲線為S型。角蛋白（keratin）：由處于α-螺旋或β-折疊構象的平行的多肽鏈組成不溶于水的起著保護或結構作用蛋白質。