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發(fā)布時間:2021-08-30 06:41  

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1.避免長菌夏天易滋生微生物或藻類,長時間如此使用,溶劑過濾頭、管道、脫氣器、比例閥、色譜柱等容易損壞,不僅維護費用高,而且影響實驗進度。小長假儀器長期不使用時,需將使用水相的管道換換,以防止細菌滋生。2.適當使用流動相移動相應臨用現配、貼標簽、寫有效期、配置日期等。盡量用0.2μ的濾膜過濾含鹽的流動相,用0.45μ的濾膜過濾有機相,注意溶劑與濾膜的相容性。實驗時要注意梯度變化時流動相的可溶性,不可互溶的溶劑不能直接轉換,用異作過渡溶劑。注意緩沖鹽的流動相使用過渡,不直接使用有機相沖,避免鹽析,并注意清洗泵柱塞桿。對 Ch. P中磷酸肌酸鈉等度純鹽相實驗項目,建議哥哥小姐姐將配置好的流動相放入冰箱冷藏,半天后更換放置到室溫下的新流動相。其它等度條件水與有機相預混后上機,不要與泵比例閥在線混合。

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正確使用在常溫光照條件下,可聚合,緩慢聚合,這種聚合經驗逐漸沉積在進口單向閥的寶石球上,影響泵的精度,因此在使用時要注意:●盡量現用現倒,勤換新。佳棕色瓶子裝,避免陽光直接照射?!癖3智鍧崳覊m或其它雜質可能成為形成聚合物的“凝核”。若閥已被聚合物所粘住,可用熱水-異沖洗管道,也可用超聲波處理,可溶解聚合物。


篩選顆粒進入 HPLC系統后,柱子的入口端被篩板擋住,終導致柱子堵塞,表現出系統壓力增大,色譜峰變形。為此,應采取多種預防措施,包括商品儀器本身的操作步驟及各種過濾設計,努力防止或減少微粒進入 HPLC系統,從而延長儀器及色譜柱的使用壽命,提高數據的可靠性。HPLC系統中,顆粒物的來源主要有三種:流動相、試樣以及儀器系統各部件的磨損。1、流動相若流動相都是 HPLC級溶劑,則無需對流動相進行過濾。由于 HPLC級別的,如、等,在生產工藝過程中均經過0.2μ m微孔濾膜過濾。與此類似,不管你是購買的 HPLC級別的水,還是用實驗室的超純水凈化系統配制而成,一步也要經過0.2μ m的微孔過濾器。

流相通過0.45μ m的微孔濾膜過濾是去除流動相中所有顆粒的一種有效方法。0.2μ m微孔的濾膜也能用,但就這一應用而言,它們并不比0.45μ m的微孔濾膜更有效,過濾速度會更慢,尤其是在實驗室所用試劑和水質量不佳的情況下。有人建議,實驗室在編寫其流動相制備標準操作程序(SOPs)時,應借鑒國際上同類實驗室的規(guī)定,即:只用 HPLC級液體制備流動相時無需過濾,相反,所有流動相組成在使用前都要過濾。輸液瓶與泵接的輸液管末端入口采用沉式過濾器(一般材料為熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬兩種)。這種濾清器規(guī)格為大于10μ m的微孔物質,因此它不能替代流動相過濾步驟,但它可以清除系統內的灰塵,保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。



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無過濾相的流動…由于柱塞、密封環(huán)、氣缸體和單向閥等雜質顆粒都會磨損,因此,應該在流動相中預先除去任何固體顆粒。好的流動相是在玻璃容器中蒸餾,而通常的過濾方法是濾過,可以使用 Millipore濾膜(0.2μ m或0.45μ m)等過濾器。泵入口處應接砂濾棒(或片)。應該經常清洗或更換輸液泵的濾器。泵用后不能及時清洗移動相中不得含有腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不能留在泵中,特別是當泵停泵過夜或更久時。若含有緩沖液的流動相留在泵中,可能會析出鹽的微晶,如上述固體顆粒那樣損壞密封環(huán)和柱塞,甚至只是因為溶液處于靜止狀態(tài)時,會析出。所以,必須用純水將泵完全清洗干凈,然后換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可能是或-水)。

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可流動相消失…水泵工作時要注意防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則泵運轉也會磨損柱塞、氣缸或密封環(huán),終造成泄漏。如果沒有流動相的外流,沒有壓力指示怎么辦?也許是泵內有大量的氣體,此時可開啟泄壓閥,使泵在較大流量(如5 ml/min)下運轉,排出氣泡,也可用一個50ml的針筒在泵出口協助抽氣。另外一個可能的原因是密封環(huán)磨損需要更換。



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下面的圖表是GS-MS在隔板扎針后的測試譜對比,樣品瓶中的溶劑是。黑線為溶劑空白譜圖,藍色曲線是蓋子正確上緊的譜圖,玫紅色曲線是壓蓋過緊的封蓋。很顯然,將蓋子擰得過緊的試樣會有較多的硅氧烷峰(注意:概率不是100%),硅氧烷峰更多說明有隔墊碎屑掉入瓶中。用肉眼觀察的樣品瓶未見隔墊碎屑,說明隔墊碎屑很小。當蓋正確上緊時,隔板呈現的狀態(tài)為平緩至略凹的狀態(tài)??梢酝ㄟ^觀察隔板的狀態(tài)判斷蓋子是否正確上緊,從而調節(jié)蓋子的松緊程度。對手勁比較大的小伙伴,可輕輕一擰,蓋就是太緊了,所以需要特別注意。

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若要正確壓蓋,則需調整壓蓋裝置。下面是調整蓋子的方法:先調整定位螺釘:先旋松鎖緊螺母,再根據所需松緊來確定螺釘的高度(如確實壓蓋松了,就把螺絲高度調低),將鎖緊螺母旋到底部鎖定位置。第二,在只依靠定位螺釘也無法調整壓蓋的情況下,使用內六角扳手調整壓蓋中部的螺釘。若壓力過大,則內六角扳手逆時針方向轉動,如壓得太緊則順時針方向轉動。