分子生物學(xué)服務(wù)

 公司建有100平米分子實(shí)驗(yàn)室，配備有PCR儀、定量PCR儀、電泳儀、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫?fù)u床、垂直電泳儀、蛋白轉(zhuǎn)印儀、蛋白發(fā)光成像儀等設(shè)備。由于腺病毒的這些特點(diǎn)使其廣泛地應(yīng)用于體外基因轉(zhuǎn)導(dǎo)、體內(nèi)接種yi苗、和基因zhi療等各個(gè)領(lǐng)域。分子組技術(shù)人員畢業(yè)于中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院、浙江理工大學(xué)等高校生物醫(yī)學(xué)相關(guān)，全部具有碩士研究生以上學(xué)歷，熟練掌握分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，可開(kāi)展多種分子生物學(xué)檢測(cè)服務(wù)。

注意事項(xiàng)

1. 為了避免蛋白質(zhì)變性，不要對(duì)樣品劇烈攪動(dòng)和反復(fù)凍融。

2. 緩沖溶液成分盡量模擬細(xì)胞內(nèi)環(huán)。。

3. 為了避免蛋白質(zhì)的氧化，將 0.1～1 mmol/LDTT（二硫蘇糖醇）(或 β-巰）加入到緩沖溶液中。

4. 為了避免重金屬對(duì)目標(biāo)蛋白的破壞，將 1～10 mmol/LEDTA 金屬螯合劑加入。

5. 為了避免微生物生長(zhǎng)，使用滅菌溶液。在純化任何一種蛋白質(zhì)的時(shí)候，均必須時(shí)刻對(duì)它的穩(wěn)定性注意維護(hù)，使它的活性得到保護(hù)，需要牢記如下一些通用的注意事項(xiàng)。

6. 盡可能置于冰上或者在冷庫(kù)內(nèi)進(jìn)行操作。

7. 蛋白濃度不要太稀。

8. 除非是進(jìn)行聚焦層。否則 pH 需要合適，防止所使用的緩沖溶液 pH 與 pI 相同，使蛋白質(zhì)的沉淀得以避免。

9. 使用蛋白酶，避免蛋白酶對(duì)目標(biāo)蛋白的降解；在純化細(xì)胞中的蛋白質(zhì)時(shí)，將 DNA 酶加入來(lái)使得 DNA 降解，避免 DNA 對(duì)蛋白的污染。

3.引物的OD數(shù)如何定量？

答：引物合成引物OD數(shù)是這樣測(cè)定的：用紫外分光光度計(jì)，波長(zhǎng)260nm，石英比色杯，光程為1厘米，測(cè)定溶液的光密度。目前定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)主要分為標(biāo)記(label)策略和非標(biāo)記的(labelfree)定量策略，其中標(biāo)記策略又分為體內(nèi)標(biāo)記(如SILAC、15N標(biāo)記)，以及體外標(biāo)記(如iTRAQ、TMT標(biāo)記)。測(cè)定時(shí)溶液的光密度好稀釋到0.2-1.0之間。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，用1ml水稀釋測(cè)OD值。需要根據(jù)稀釋倍數(shù)換算出母液的OD值。

4.需要什么級(jí)別的引物？

答：引物常用的純化方式脫鹽、BioRP / OPC純化、PAGE純化、HPLC純化。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，確定訂購(gòu)引物的純度級(jí)別。