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發(fā)布時間:2021-06-30 04:11  
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按照PQR三原則法進行評價。P指的是Purity(純度),具體而言就是磁珠提取后的核酸中含有多少非核酸類的雜質殘留,如蛋白、鹽、多糖等。該指標通常用吸光度比值(A260/A280和A260/A230)來衡量。
Q指的是Quality(質量),磁珠提取后的核酸尤其是較長的基因組核酸應保持其完整性,不應出現(xiàn)斷裂或降解等現(xiàn)象。該指標可通過簡單的凝膠電泳或者復雜一些的特定PCR及微流控芯片(如Agilent Bioanalyzer)進行評估。
R指的是Recovery(收率),磁珠提取過程應當盡量將所有的核酸都能從樣本中提取出來。高收率對于核酸檢測尤其是疾病早期檢測的靈敏度至關重要,在疾病早期,樣本中的病原體核酸含量通常較低,如果不能地提取到所有核酸,那么很容易出現(xiàn)假陰性,導致漏檢。
固定化酶是通過物理的或化學的方法,將酶分子束縛在載體上,使其既保持酶的天然活性,又便于與反應液分離,可以重復使用,它是酶制劑中的一種新劑型。運用磁性高分子微球作為結合酶的載體,具有以下優(yōu)點:有利于固定化酶從反應體系中分離和回收,操作簡便。對于雙酶反應體系,當一種酶的失活較快時,就可以用磁性材料來固載另一種酶,回收后反復使用,降低成本;磁性載體固載酶放入磁場穩(wěn)定的流動床反應器中,可以減少持續(xù)反應體系中的操作,適合于大規(guī)模連續(xù)化操作;利用外部磁場可以控制磁性材料固定化酶的運動方式和方向,替代傳統(tǒng)的機械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率。
磁性微球能與蛋白質產(chǎn)生表面吸附作用,具有一定的相容性,它能使蛋白質純化而又不改變蛋白質的性質,并且磁性微球純化蛋白質不受溫度的影響,但是隨著時間的延長、pH值的升高,吸附量會有所降低。
細胞分離與標記:利用磁性微球進行細胞分離的一般過程是,將抗細胞表面特異性包被磁球表面,與細胞原液混合孵育、磁分離,然后用適當方法解離,并將磁球分離出來,得到純凈的細胞。磁性微球在應用于細胞分離時,通過選擇表面特異性的不同,既可以用于分離不需要的細胞,也可用于富集所需要的細胞。
微球已研究多年,但是目前已上市的僅有緩釋微球,靶向微球還處于研發(fā)階段。微球制劑技術的關鍵仍是靶向性,只有從根本上解決靶向性問題,才能解決藥致命的毒副作用。靶向微球制劑的研發(fā),以及靶向性的體內外評價方法仍然是今后研究的熱點。而針對已上市緩釋微球產(chǎn)品而言,很多微球的關鍵質量屬性并沒有體現(xiàn)在產(chǎn)品的質量標準中,這就要求在微球的質量研究中,一方面要建立準確可行的實驗方法來對微球制劑關鍵質量屬性進行控制,另一方面,要研究這些關鍵質量屬性與質量的內在聯(lián)系,從而建立合理規(guī)范的限度要求。例如微球的粒度分布與釋放度有密切聯(lián)系,粒度分布能指征體外釋放度,因此建立合理有效的粒度分布限度范圍可以作為對釋放度控制的一個重要補充。