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發(fā)布時間:2020-09-14 04:44  
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顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
顛覆傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)RCCS-3D三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)
RCCS 是一種顛覆傳統(tǒng)的三度空間微重力培養(yǎng)系統(tǒng)。其利用培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱進行培養(yǎng),將培養(yǎng)液、細胞或組織一起加入培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱中,并去除所有氣泡。培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱安裝于具旋轉馬達之基座上,內部組織、細胞或細胞團塊因旋轉切線力量及重力雙重影響下而保持懸浮狀態(tài)。隨著細胞或組織成長,旋轉速度可做調整,細胞形成團塊之后,必須提高轉速使其 不會沉降而碰觸底部。旋轉的目的是要讓所有細胞均勻交換養(yǎng)分和氣體,并且細胞和細胞之間可有足夠的接觸,有利于細胞聚集。另外,不論是培養(yǎng)盤或培養(yǎng)管柱背側均具備硅膠制成的換氣膜以利進行1氣體交換,使細胞/ 組織得到充分氧氣及排除代謝后的廢氣。
RCCS轉壁式生物反應器在細胞增值技術中的應用!
細胞增殖檢測技術
目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過直接測定進行分裂
的細胞數(shù)來評價細胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細胞活力(cell viability)檢測方法,通過檢測樣品中健康細胞的數(shù)目來評價細胞的增殖能力。顯然,細胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動凋亡程序,但的干擾可抑制凋亡的發(fā)生;這時若采用細胞活力檢測法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細胞數(shù)量,但我們并不能從干擾組細胞數(shù)大于對照組的事實說明可促進細胞增殖的結論。所以直接的證據(jù)應該采用方法一。
其中常見檢測:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克X隆形成。
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細胞貼壁免受機械損傷!
RCCS-3D模擬微重力三維動態(tài)培養(yǎng)系統(tǒng)能夠使細胞貼壁免受機械損傷。
RCCS-3D旋轉三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)是一種不同于普通轉瓶培養(yǎng)的系統(tǒng)。轉瓶包含一個縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下,氣體運輸是通過瓶頸。并且,轉瓶培養(yǎng)的目的不是三維培養(yǎng),而是二維培養(yǎng)。培養(yǎng)物沿著瓶壁生長,并且,當瓶轉動,培養(yǎng)物就會與媒介接觸。因此,這兩個系統(tǒng)之間沒有相似性(參見問題1RCCS生物反應器的工作原理)。
對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨1髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血1清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血1清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血1清蛋白形成了血1清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用。血1清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解1毒中起重要作用,如SeO3,硒等。
RCCS中的細胞分化和3D結構
RCCS中的細胞分化和3D結構,微重力組織工程學是近年來美國空間生物技術研究人員開創(chuàng)的一個獨特研究領域,其核心技術是建立動物細胞的三維培養(yǎng)體系。組織工程學的主要目的就是如何形成X好的3D 結構,達到滿足器X官替代物的要求,或適于體外研究(如毒性)。微重力有益于組織的重建,保持組織3D聚集時的特異性分化,即可滿足這種條件。