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發(fā)布時(shí)間:2021-05-13 07:33  
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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。SPE柱規(guī)格
在選擇固相萃取機(jī)理時(shí),應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機(jī)理,因?yàn)樵S多化合物同時(shí)具有多種功能基。例如:2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16),它在一定 pH條件下也可呈陽(yáng)離子態(tài),同時(shí)它又具有疏水性和親水性的非極性官能團(tuán)。此時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況,選擇有利于從干擾物中分離目標(biāo)化合物的萃取機(jī)理。當(dāng)樣品基質(zhì)中同時(shí)含有大量非極性干擾雜質(zhì)時(shí),應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機(jī)制,而應(yīng)采用以 pKa以下兩個(gè) pH單位或以 pH=2.16為限的陽(yáng)離子交換機(jī)制。相反,如果樣品中同時(shí)含有大量干擾雜質(zhì)陽(yáng)離子,則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高),采用非極性萃取機(jī)制更為有利。
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骨架形狀,粒徑,孔徑
硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無(wú)定型C18材料具有較高的性能價(jià)格比,是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性,但相對(duì)價(jià)格可能稍高,可作為精制的選擇。
現(xiàn)在市場(chǎng)上可供選擇的填料粒徑很多,中低壓備通常是為了增大上樣量,增加流速,減小壓力而選用大粒徑填料;由于可以達(dá)到較高的柱效,因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時(shí)還應(yīng)充分考慮孔徑,分子量小于5000 da時(shí)選擇孔徑(80~120 da),而對(duì)于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品,通常不采用C18分離模式,采用 SEC等模式進(jìn)行分離。
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對(duì)正相體系,先對(duì)目標(biāo)化合物的正己烷溶液進(jìn)行上樣,然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正己烷溶液對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行洗脫,分別收集洗脫液的分析結(jié)果,建立淋洗曲線(xiàn),確定目標(biāo)化合物洗脫后的溶劑體系,淋洗后的甲1基叔丁基1醚含量應(yīng)略低于目標(biāo)化合物恰好被洗脫時(shí)的溶劑體系,而洗脫液中甲1基叔丁基1醚的含量應(yīng)略高于目標(biāo)化合物正好被洗脫時(shí)的溶劑體系。
合理處理 SPE柱,在 SPE柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中,活化溶液應(yīng)選擇整個(gè)洗脫過(guò)程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系。
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樣本制備問(wèn)題
大部分流速問(wèn)題是由于樣品制備不當(dāng)造成的。例如樣品混濁、離心過(guò)濾不充分造成上樣時(shí)篩板堵塞,或樣品本身的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)處理不當(dāng),造成有效蛋白沉降,造成篩板堵塞。通過(guò)改進(jìn)前處理方法,可解決由這種原因引起的流速問(wèn)題。因此,樣品準(zhǔn)備是保證 SPE正常流動(dòng)速度的di一步。
小柱子本身因素(填充尺寸和柱子體積)
充填粒徑的作用,大充填粒徑的充填越疏松,流動(dòng)相阻力越小,流速越快;小充填粒徑的作用,充填越緊,流速越慢。這一現(xiàn)象在弗羅里硅土和硅藻土小柱中都很明顯。小柱粒徑范圍一般為40-60 um,農(nóng)殘級(jí)弗羅里硅土的粒徑范圍為75-150 um,大柱粒徑范圍為600-900 um。因此弗羅里硅土和硅藻土小柱的流速會(huì)比一般小柱要快,特別是大孔硅藻土小柱,在使用時(shí)需要配以導(dǎo)流針來(lái)控制流速。
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固相萃取產(chǎn)品采用高度均勻的聚合物微球和二氧化硅微球作為固相萃取材料的骨架,同時(shí)材料本身還具有比表面積大、高密度、功能性團(tuán)狀等特點(diǎn),這將顛覆市場(chǎng)上用尺寸不均、形狀不規(guī)則的微球作為固相萃取填料的產(chǎn)品。
均勻顆粒度的固相萃取產(chǎn)物,經(jīng)過(guò)同樣體積的淋洗后,可獲得較多的理論塔板數(shù)目,對(duì)回收不易分離的化合物有明顯幫助。
反壓小,通過(guò)率高,解決了粘性試樣堵塞柱體的問(wèn)題。粒徑均勻,球形填料,使溶液與固相萃取填料充分接觸,流動(dòng)速度均勻。
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選擇好 SPE柱的種類(lèi)之后,我們需要確定 SPE柱的規(guī)格,即 SPE柱的裝填量?,F(xiàn)在,市場(chǎng)上 SPE柱填料的質(zhì)量主要有100 mg,200 mg,300 nag,500 mg,1000 mg等等。膜式 SPE柱比常規(guī) SPE柱填充量小。
通常有20 mg,30 mg,50 mg,100 mg等等。SPE柱按其尺寸分為1 mL、3 mL和6 mL三種。還有8 mL,10 mL甚至更大的 SPE柱,但是這些大體積的 SPE柱在實(shí)際中并沒(méi)有被廣泛使用。
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固相萃取柱(英文,簡(jiǎn)稱(chēng) SPE柱,或 Solid Phase extraction Cartridges,簡(jiǎn)稱(chēng) SPE柱,簡(jiǎn)稱(chēng) SPE柱)是一種從層析柱中提取、分離和濃縮樣品的前處理設(shè)備。
通常固相萃取柱大多采用聚(PP)為材料的注射針筒裝置,其內(nèi)部裝有兩片塞片,塞片是用聚乙烯(PE)或玻璃纖維制成的,塞片的中間裝有一定量的色譜吸附劑(填料)。固相萃取柱的上端開(kāi)放,下端為出液口,液體通過(guò)吸附劑從出口流出。
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