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發(fā)布時(shí)間:2020-12-21 04:00  

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三(羥)(TRIS):三羥(TRIS)是一種重要的有機(jī)化工原料,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、、材料等領(lǐng)域。在生物化學(xué)方面,TRIS用作緩沖液的組分來調(diào)節(jié)體系的pH值;分子生物學(xué)方面,TRIS可以作為一些酶的,用于蛋白的研究;材料方面,TRIS可用于制備一些水溶性涂料的分散劑 ,也可用作空氣凈化器材料的組分; 醫(yī)面, TRIS用于合成磷氨、酮咯酸氨、右旋硫辛酸氨等。




Tris本身呈堿性,只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液,方法也較為簡單,而且還可以與其他物質(zhì)組成多種緩沖體系;對生物化學(xué)過程干擾很小,也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。但是,Tris緩沖液的pH值受溶液濃度和溫度影響較大,稀釋十倍,緩沖液的pH值變化大于0.1,溫度每升高一度,pH值下降0.03;同時(shí)其易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。





Tris緩沖液為弱堿性溶液,DNA在這樣的溶液中會被去質(zhì)子化,從而提高其溶解性,所以在核酸的溶解及核酸提取中一般也使用Tris緩沖液。需要注意的是,因其配置溶液時(shí)顯堿性,會吸收部分空氣中能生成碳酸的二氧化碳?xì)怏w,所以需要將盛裝Tris溶液的瓶蓋蓋嚴(yán)。另外Tris溶液對溫度敏感,每升高1度,pH值下降0.03,配置時(shí)需維持在室溫。





許多緩沖液中含有NaCl,以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理?xiàng)l件。一般常用150 mM的NaCl。

    在不同的蛋白純化步驟中,可能需要改變鹽離子的濃度。例如,如果是通過離子交換層析進(jìn)行蛋白純化,一開始需要降低鹽離子的濃度(5~25mM)避免高離子強(qiáng)度和蛋白競爭和填料結(jié)合,這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿,從而使柱子能夠結(jié)合目的蛋白,洗脫除去雜蛋白。