廣州碩譜生物科技有限公司SPE專用柱批發(fā)

SPE小柱保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步：

1）、活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個過程不要使小柱干涸）。

2）、上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時大部分目標(biāo)化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過快）。

洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液（注意流速不要過快）.

淋洗通常需要干燥，原因是什么？

回答：淋洗液一般都要干燥，主要考慮以下因素：

1.通常因為反相萃取用于化合物的預(yù)處理，正如反相萃取在色譜中是一種常見的分離方法，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分，從而便于后續(xù)的干燥、濃縮步驟。

2.有些項目，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml甲1醇洗脫，這個過程將洗脫和定容集進(jìn)行一步處理，前者的處理必然會對洗脫步驟的定量結(jié)果產(chǎn)

三、就是溶劑互溶問題，當(dāng)淋洗過程中使用的溶劑的極性與洗脫溶劑的極性相差很大時，就會產(chǎn)生1乳化分層，洗脫阻力大，洗脫液有被稀釋的危險等，從而導(dǎo)致洗脫效果不同，從而導(dǎo)致試驗結(jié)果的失敗。

色譜柱保存

反相色譜柱，保存溶劑通常是含至少30% 有機(jī)相的水溶液，也可在常規(guī)清洗后直接保存在有機(jī)相中。

如果需要長時間儲藏，則需要使用較高比例的有機(jī)相（有機(jī)相比例至少大于50%）

固相萃取知識

要有效地利用離子交換機(jī)理將目標(biāo)化合物吸附在SPE柱上，必須滿足以下兩個條件：

（1）目標(biāo)化合物離子與吸附劑官能團(tuán)的離子態(tài)帶相反電荷；

（2）萃取環(huán)境的pH必須同時使目標(biāo)化合物和吸附劑上的官能團(tuán)帶電荷；

（3）萃取環(huán)境不能含有高濃度的帶有和目標(biāo)化合物相同電荷的競爭化合物。

在實際操作中，為了滿足前兩個條件，確保99%以上的目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑上的官能團(tuán)能夠呈離子態(tài)或呈中性狀態(tài)，應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)化合物及固相萃取吸附劑官能團(tuán)的pKa來調(diào)節(jié)樣品或SPE柱的pH。

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   淋洗液需要抽干的原因主要有兩個：

1一般淋洗液與洗脫液的極性差異會很大(如淋洗液為水，洗脫溶劑為正己烷或二氯甲i烷)，兩種溶劑不能互溶或溶解，從而造成洗脫液流不下或流速慢，妨礙洗脫溶劑與目標(biāo)物接觸，洗脫效果差，回收率低。

2淋洗液如果是水，不進(jìn)行抽干，就會有一部分被收集到洗脫液中，洗脫液如果進(jìn)行氮吹，則含水的洗脫液也很難吹干，如果進(jìn)行長時間的氮吹，就會導(dǎo)致少量的水溶液被吹干，出現(xiàn)回收率偏低的情況，因此淋洗后就需要進(jìn)行抽干操作。

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固相萃取的基本原理：

離子作用力

離子作用力發(fā)生在帶相反電荷的目標(biāo)物與固相萃取填料之間，在離子交換固相萃取中，樣品基質(zhì)可以是極性，也可以是非極性，但是離子交換的選擇性是作用力中zui好的。