斜面菌種低溫保藏法對那些菌種能夠使用

此方法是很常用的，廣泛適用于細菌、酵母菌和霉菌等大多數(shù)微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。

此方法的缺點是菌株仍有一定程度的代謝活動能力，保藏期短，傳代次數(shù)多，菌種較容易發(fā)生變異和被污染。

正常情況下的保菌期：霉菌和有芽孢的細菌一般可保存6個月左右，無芽孢的細菌可保存1個月左右，酵母菌可保存3個月左右。

低溫生物菌種處理的優(yōu)勢

我國北方污水處理一直受到低溫影響，尤其氨氮處理效果差、出水難以達標等問題的困擾。目前污水廠一般采用增加污泥濃度、水力停留時間、池體保溫加蓋等措施以提高處理效果，但投資和運行費用增加的問題也隨之而來。溫度降低所導(dǎo)致的生物處理效果下降，歸根結(jié)底是由于當(dāng)水溫低于15℃時，處生化系統(tǒng)中存在的低溫微生物的數(shù)量和活性不能達到常溫下中溫菌的水平，污水中的有機污染物質(zhì)不能被迅速降解所導(dǎo)致的。因此，采用投加耐低溫生物菌劑的方式對東北地區(qū)污水處理廠生化處理系統(tǒng)的耐低溫菌種改良，對低溫快速啟動和污水處理廠污水穩(wěn)定達標排放意義重大。

                                                            低溫生物菌種的脫水存法

③ 石蠟油封存法，在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。

低溫生物菌種的孢子分離法

( 1 )褶上涂抹法:選取新鮮、健壯、未開傘、的子實體，洗凈后用0 75 %酒精表面滅菌2 分鐘，然后連同培養(yǎng)基一起放入接種箱內(nèi)，經(jīng)馬林熏蒸消毒12 ~ 24 小時，再按無菌操作技術(shù)將接種環(huán)在子實體菌褶上涂抹，把涂抹后帶孢子的接種環(huán)在培養(yǎng)基上劃線接種，，然后置于25 ~ 28 ℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)，可得純菌種。

( 2 )孢子印采集法:取滅過菌的載玻片、試紙或黑布，置于新鮮、未開傘或未開裂的子體菌褶的下方。經(jīng)24 小時后，便落下孢子，形成印痕(即孢子印)。然后，用接種環(huán)或玻璃棒蘸取孢子，接種在平面或斜面培養(yǎng)基上，進行恒溫培養(yǎng)，可得純菌種。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃鐘罩、培養(yǎng)皿、三角架、搪瓷盤等組成。鐘罩下為一搪瓷盤，直徑25 厘米左右，盤內(nèi)先墊襯4~6 層紗布，中央放1 副9 厘米直徑的培養(yǎng)皿，大蓋口朝下，上放小的，口向上。然后，在上面小的培養(yǎng)皿上放1 只鉛絲繞成的三角架，再將帶孔的玻璃鐘罩蓋上，頂上罩孔用棉塞塞好，用紗布包好整個孢子收集器，置于高壓滅菌鍋或蒸籠內(nèi)滅菌2小時。