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發(fā)布時間:2020-11-14 09:55  
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病毒分離純化挑戰(zhàn)與突破
春節(jié)期間一場突如其來的新型冠狀病毒肺l炎疫情導(dǎo)致超近8萬人感l染,超過2700人失去生命,1000多萬人口的武漢實施了史l上前l所未有的封城。這個讓中國的經(jīng)濟活動幾乎處于停頓狀態(tài),讓全世界感到恐慌的肺l炎疫情卻是由小小的病毒引起的,它們是如此之小,以至于您無法在光學(xué)顯微鏡看清楚它們。這次疫情即讓我們體會到自然界的威力也讓我們體會到自然界無窮的奧妙。即使是科學(xué)技術(shù)高度發(fā)達的今天對這種病毒的了解也是非常有限,對病毒引起的很多疾病我們也沒有很多好的應(yīng)對方法。人類不僅僅只是這次遭受病毒引起的肺l炎疫情磨難,其
實各種流l感、艾l滋病、麻l疹、風l疹、天花、水l痘、病l毒性肝l炎、流行性乙型腦炎等各種疾病都是病毒引起的。
病毒相對于宏觀世界物質(zhì)甚至與細菌相比都是極其微小的生物體,但與傳統(tǒng)蛋白及核酸生物分子相比,其尺寸又大很多,結(jié)構(gòu)也復(fù)雜得多。病毒結(jié)構(gòu)通常由蛋白質(zhì)組成外衣殼,由核酸組成內(nèi)芯,因此比蛋白和核酸分子都要復(fù)雜很多。病毒尺寸一般在20-100納米之間,而細菌尺寸一般在1000納米以上,蛋白分子尺寸往往在10納米以下。人們只能借助電子顯微鏡才能看到病毒的結(jié)構(gòu)和形貌。雖然多肽,蛋白,核酸等生物大分子都有成熟的分離純化方法,但病毒到目前也沒有一個比較理想的分離方法。
小粒徑無孔單分散層析介質(zhì)用于病毒的分離純化
傳統(tǒng)的層析介質(zhì)填料都是多孔的微球,因為多孔微球材料的比表面積大,因而可以對一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質(zhì)的孔徑一般都小于2000?(通常都小于100納米)。而很多病毒顆粒的粒徑一般都大于20納米,有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因,病毒顆粒無法擴散進入層析介質(zhì)的孔內(nèi),因而在層析吸附病毒顆粒時只有介質(zhì)微球的外表面可以利用,孔內(nèi)表面積由于體積排阻的原因而無法吸附病毒顆粒。然而,病毒樣品中的雜質(zhì)分子一般都比病毒小,因而可以擴散進入層析介質(zhì)孔內(nèi)被吸附在里面。由于傳統(tǒng)層析介質(zhì)孔內(nèi)表面積遠遠大于介質(zhì)微球外表面積,雜質(zhì)吸附往往由于孔內(nèi)表面積的存在而非常顯著,吸附洗脫時雜質(zhì)含量因而較高,病毒顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質(zhì)由于沒有大量只能容納雜質(zhì)進入而病毒顆粒無法擴散進入的內(nèi)孔,病毒顆粒在介質(zhì)外表面的層析吸附量雖然不會有明顯變化,但樣品中的雜質(zhì)被層析吸附的量會顯著減少。因此經(jīng)無孔層析填料層析洗脫后,病毒樣品的分離純度顯著提高。