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發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 05:59  
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廣州碩譜生物科技有限公司NH2固相萃取柱批發(fā)
SPE小柱保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步:
1)、活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境(注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸)。
2)、上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱,此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出,雜質(zhì)被保留在柱上,故此步驟要開(kāi)始收集(注意流速不要過(guò)快)。
洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集,合并收集液(注意流速不要過(guò)快).
淋洗通常需要干燥,原因是什么?
回答:淋洗液一般都要干燥,主要考慮以下因素:
1.通常因?yàn)榉聪噍腿∮糜诨衔锏念A(yù)處理,正如反相萃取在色譜中是一種常見(jiàn)的分離方法,反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液,除去水分,從而便于后續(xù)的干燥、濃縮步驟。
2.有些項(xiàng)目,在淋洗步驟完成后,直接用一定量的洗脫液,如1 ml甲1醇洗脫,這個(gè)過(guò)程將洗脫和定容集進(jìn)行一步處理,前者的處理必然會(huì)對(duì)洗脫步驟的定量結(jié)果產(chǎn)
三、就是溶劑互溶問(wèn)題,當(dāng)淋洗過(guò)程中使用的溶劑的極性與洗脫溶劑的極性相差很大時(shí),就會(huì)產(chǎn)生1乳化分層,洗脫阻力大,洗脫液有被稀釋的危險(xiǎn)等,從而導(dǎo)致洗脫效果不同,從而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果的失敗。
對(duì)SPE柱進(jìn)行合理的處理
在 SPE柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,有效活化可避免干擾物進(jìn)入洗脫液中,活化溶液應(yīng)選擇整個(gè)洗脫過(guò)程中洗脫強(qiáng)度zui高的溶劑體系;在反相模式下,從樣品溶液到洗脫液的過(guò)程主要涉及到0%-100%甲1醇水溶液,因此應(yīng)選擇純甲1醇活化溶液,而在目標(biāo)化合物需要用甲1醇-甲ji叔丁基醚混合液洗脫時(shí),則應(yīng)選擇純甲ji叔丁基醚溶液;在正相模式下,從樣品溶液到洗脫液的過(guò)程主要涉及到0%-100%正己烷-甲ji叔丁基醚溶液的過(guò)程,因此活化溶液應(yīng)選擇純甲ji叔丁基醚溶液。
色譜柱技術(shù)的差距在哪里?
答:色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗(yàn)積累。
國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比,我認(rèn)為色譜柱的差距在于:國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開(kāi)發(fā)填料,一般買國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱,買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短,經(jīng)驗(yàn)積累少,裝柱工藝也沒(méi)有完全達(dá)到國(guó)外水平。另外,對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠,國(guó)產(chǎn)的還不過(guò)關(guān),在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比,差距很大。
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