親和柱原理介紹

親和層析（IAC）可稱為色譜技術(shù)，是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復(fù)雜的待測(cè)樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價(jià)結(jié)合，然后裝入小柱，將被測(cè)溶液流過(guò)親和柱，而非目標(biāo)化合物則沿柱流下，然后用洗脫緩沖液洗脫抗原（被測(cè)物），從而得到純化的抗原（被測(cè)物），收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計(jì)檢測(cè)。

親和柱介紹

生物分子之間的親和識(shí)別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用，這些親和作用屬于生物專一性識(shí)別；此外，某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用，如染料和某些酶（特別是脫氫酶和激酶等），植物凝集素和糖蛋白，金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用，都可以應(yīng)用于親和分離過(guò)程。

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雙酚A檢測(cè)新方法——親和柱凈化-液相色譜法

雙酚A，也稱BPA，在工業(yè)上被用來(lái)合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹(shù)脂等材料。許多科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，雙酚A會(huì)發(fā)揮類似雌素的作用擾亂人體內(nèi)的代謝過(guò)程。。我國(guó)、歐盟、美國(guó)等都禁止其用于嬰幼兒奶瓶。但目前對(duì)于雙酚A的檢測(cè)前處理僅有少量文獻(xiàn)報(bào)道，均采用簡(jiǎn)單的萃取、濃縮或SPE固相萃取柱凈化。中檢維康研發(fā)團(tuán)隊(duì)將專一性強(qiáng)、穩(wěn)定性高的層析技術(shù)應(yīng)用于雙酚A檢測(cè)，力圖簡(jiǎn)化樣品前處理，提高檢測(cè)靈敏度及凈化效果。

雙酚A親和柱能夠特異性的純化樣品中的雙酚A，將樣品溶液通過(guò)親和柱時(shí)，雙酚A鍵合在親和柱中的上。用蒸餾水將雜質(zhì)淋洗去除。將凈化、濃縮后的雙酚A從上分離下來(lái)。然后，注入HPLC或LC-MS進(jìn)行測(cè)定。

親和柱親和層析技術(shù)原理

IAC也是色譜技術(shù)的一種,可稱為色譜技術(shù),是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復(fù)雜的待測(cè)樣品中提取目標(biāo)化合物。主要原理是將與惰性微珠共價(jià)結(jié)合,然后裝柱,將抗原溶液過(guò)親和柱,而非目標(biāo)化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當(dāng)?shù)木彌_液和合適的保存方法,柱可以再生備用。其提純效率很高,通常只需一次就可達(dá)到1000～10000倍的純化效果(王澤永,2002)。