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動(dòng)物細(xì)胞模型誠(chéng)信企業(yè)「英瀚斯」

發(fā)布時(shí)間:2021-08-18 05:46  

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在各種致病因素作用下,大腦實(shí)質(zhì)受到損傷后可出現(xiàn)神經(jīng)功能改變,如偏癱、平衡失調(diào)等。

對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型而言,造模結(jié)束只是步,驗(yàn)證個(gè)體模型是否成功是第二步,而控制組內(nèi)個(gè)體特征一致性是第三步。

采用神經(jīng)功能評(píng)分是重要的觀察指標(biāo),可以用來(lái)在體評(píng)價(jià)模型是否成功或者病變嚴(yán)重程度。盡量控制動(dòng)物模型的評(píng)分一致性是很困難但不得不做的一件事。

這里介紹三種常見(jiàn)的嚙齒類神經(jīng)功能評(píng)分方法。


一、【Longa評(píng)分法】

① 無(wú)神經(jīng)功能缺陷:0分;

②癱瘓側(cè)前爪不能完全伸展:1分;

③行走時(shí)向癱瘓側(cè)轉(zhuǎn)圈:2分;

④行走時(shí)向癱瘓側(cè)傾倒:3分;

⑤不能自動(dòng)行走,存在意識(shí)喪失現(xiàn)象:4分。

二、【Bederson評(píng)分法】

抓起動(dòng)物的尾巴,使動(dòng)物離臺(tái)面10cm高。此時(shí),正常大鼠的前爪處于伸直狀態(tài),而存在神經(jīng)功能病變的動(dòng)物則可出現(xiàn)如下表現(xiàn):

②動(dòng)物尾巴提起后,癱瘓側(cè)前肢回收并屈于腹下,而正常側(cè)肢體伸向臺(tái)面:1分;

③除第二條表現(xiàn)以外,俯臥于臺(tái)面時(shí)向癱瘓側(cè)側(cè)推動(dòng)物的阻力較正常側(cè)明顯降低:2分;

④除條和第二條以外,動(dòng)物行走時(shí)向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn):3分。

三、【平衡木評(píng)分法】

一根長(zhǎng)為80cm、寬為2.5cm的木條,水平固定在離臺(tái)面10cm高度的地方,然后讓動(dòng)物在木條上行走。

①能跳上平衡木條,可以自由行走但不跌倒:0分;

②能跳上平衡木條,動(dòng)物在上面行走會(huì)跌下,但跌下的機(jī)會(huì)小于50%:1分;

③能跳上平衡木條,動(dòng)物在上面行走會(huì)跌下,但跌下的機(jī)會(huì)大于50%:2分;

④動(dòng)物在正常側(cè)身體的幫助下可以跳上平衡木條;但是癱瘓側(cè)的后肢不能夠幫助身體向前移動(dòng):3分;

⑤動(dòng)物無(wú)法在平衡木條上行走,但是可以坐在木條上:4分;

⑥將動(dòng)物放在木條上,動(dòng)物很快會(huì)掉落下來(lái):5分。








難點(diǎn)與關(guān)鍵點(diǎn)

將灌注針插入主動(dòng)脈內(nèi)是灌注固定的關(guān)鍵,也是難點(diǎn)。首先準(zhǔn)確找到主動(dòng)脈,這是此步驟的要點(diǎn)??捎脺厣睇}水將胸腔內(nèi)的血液沖洗干凈,用鑷子輕輕夾住心 外膜(夾的越少越好,以免影響取材)將心臟向左上方提起,即可看清主動(dòng)脈,又可使灌注針很容易地插入主動(dòng)脈內(nèi)。插入時(shí)動(dòng)作要慢,針尖方向不要偏向右側(cè),以 免刺入右心房,如果感到有阻力,則將針退后、調(diào)整方向重新進(jìn)針,直到進(jìn)入主動(dòng)脈,灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈后可在心臟的上方看到其位置,灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈的長(zhǎng)度 好為 3~5 毫米,然后用絲線扎緊。切勿將灌注針?lè)旁谧笮氖覂?nèi),這樣由于主動(dòng)脈瓣的關(guān)閉,灌注液很難進(jìn)入主動(dòng)脈,而是沿著心室的切口流出,致使灌注失敗。另 外,灌注針插入成功后,一定要用剪刀剪開(kāi)右心耳而不是右心室,這是灌流液的出口。剪開(kāi)心尖的位置一定要掌握好,不能偏右使灌注針插入右心室。








5. 剝奪桿睡眠剝奪法

在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室籠中采用間隙性的剝奪桿掃描進(jìn)行觸覺(jué)刺激來(lái)干擾自由行為的小鼠。該方法防止了人類接觸和干預(yù)對(duì)睡眠剝奪的影響,并且在整個(gè)睡眠剝奪過(guò)程期間小化身體活動(dòng)。此外,該程序準(zhǔn)確且可預(yù)測(cè)。實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物從小都是在飼養(yǎng)籠中長(zhǎng)大,基于實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)籠使得動(dòng)物能夠保持在正常的社會(huì)環(huán)境中實(shí)施了一種相對(duì)無(wú)壓力的方法來(lái)誘導(dǎo)動(dòng)物睡眠剝奪模型,從而避免了外界環(huán)境及其他因素對(duì)睡眠剝奪的影響。此外,基于飼養(yǎng)籠式的睡眠剝奪儀易于組裝和清洗,設(shè)計(jì)更加地人性化。