蛋白結(jié)晶自動化

1.能夠進行多種不同方法的加樣：氣相擴散法（包括坐滴法和懸滴法）； 2.坐滴懸滴蛋白以及篩選液的加樣針頭為八通道，針頭必須可自動清洗重復(fù)使用，也必須可自動更換； 3.儀器具有全自動濕度控制功能，儀器內(nèi)部帶有濕度感應(yīng)器，實時控制濕度，并且軟件界面實時顯示濕度數(shù)據(jù)，有效控制樣本液體揮發(fā)，提高實驗可重復(fù)性；（gryphon沒這個功能） 4.至少有三個微孔板位和一個深孔板位；后期能擴展升級，增加樣本池液整板分配功能，可自動從深孔板分配到微孔板。 5.八通道加樣頭須具備獨立傳感器，確保點樣，并有效防止漏點和誤操作，更好地適應(yīng)板面高低不平產(chǎn)生的誤差； 6. 大和小加樣容量：坐滴盤和懸滴盤：60nL – 1200nL； 7.加樣時間：96孔標準盤（坐滴盤和懸滴盤）：≤5分； 8.兼容市面上所有的96孔標準盤（坐滴盤和懸滴盤）； 9.加樣精度：無論液體種類和粘度100nl時CV＝５%； 10.加樣模式：可以一次吸取多次加樣； 11.機械定位精度：Z方向=50um； X, Y方向200um； 12.加樣區(qū)域完全封閉，無外界干擾。

蛋白質(zhì)晶體板制作

設(shè)計并制作了一種在微腔中對蛋白質(zhì)進行微批量法(microbatch)結(jié)晶的碟式微流控結(jié)晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級)、操作簡便的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選方法,這種芯片能成功地結(jié)晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統(tǒng)地比較這種微流控芯片與傳統(tǒng)的使用蒸汽擴散法的24孔結(jié)晶板的結(jié)晶能力,用3個Hampton結(jié)晶試劑盒,在4℃及20℃培養(yǎng)條件下分別對5種標準蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構(gòu)酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進行了結(jié)晶篩選實驗.結(jié)果表明,在4℃時微流控芯片與24孔結(jié)晶板有相近數(shù)目的結(jié)晶條件(91 vs 98)。

蛋白質(zhì)晶體板

重組蛋白技術(shù)在蛋白質(zhì)結(jié)晶、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)相互作用及結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)組學(xué)研究中具有非常重要的作用。當前對重組蛋白的純化,目前常采用固定化金屬離子親和色譜(IMAC)技術(shù),即通過IMAC材料上的金屬離子與組氨酸標簽之間的螯合作用實現(xiàn)帶組氨酸標簽的重組蛋白的純化,但是由于IMAC材料上金屬離子暴露在材料表面,任何能與金屬離子產(chǎn)生螯合作用的蛋白質(zhì)均獲在IMAC上,如表面富含組氨酸。

蛋白結(jié)晶板

盡管近些年來在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展,獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個主要瓶頸問題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法,即SLIM。該方法主要包括兩個部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進行晶體生長的時候,直接將蛋白質(zhì)溶液加入'干母液'中,從而產(chǎn)生一個固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡單、快速,而且降低了對蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。