第yi代腺病毒載體：一般將E1或E3基因缺失的腺病毒載體稱為第yi代腺病毒載體，此類型載體在未經(jīng)過純化時可引發(fā)機體產(chǎn)生較強的炎1癥反應和免1疫反應，純化后可以安全使用，體內(nèi)表達周期可達4周。

第二代腺病毒載體：E2A或E4基因缺失的腺病毒載體被稱為第二代腺病毒載體，產(chǎn)生的免1疫反應較弱其載體容量和安全性方面有所改進，但病毒包裝難度和出毒和病毒滴度下降厲害，應用相當局限。

第三代腺病毒載體：第三代載體缺失了全部的（無病毒載體，gutless vector）或大部分腺病毒基因（微型腺病毒載體，mini Ad），僅可保留ITR和包裝信號序列。第三代腺病毒載體zui大可插入35kb的基因，病毒蛋白表達引起的細胞免1疫反應進一步減少，載體中引入核基質(zhì)附著區(qū)基因可使得外源基因保持長期表達，并增加了載體的穩(wěn)定性。這一載體系統(tǒng)需要一個腺病毒突變體作為輔助病毒。

腺病毒表達

   腺病毒系統(tǒng)是很受歡迎的可以在任何哺乳動物細胞中有效瞬時表達的基因遞送平臺。對于難轉(zhuǎn)染的細胞，如原代或非分裂細胞，采用病毒遞送外源基因的方式是非常有效的選擇。鐘鼎生物采用293A腺病毒包裝細胞系（含有腺病毒包裝所必需的E1基因序列，是專為生產(chǎn)腺病毒和進行滴度測定而建立的），用于高滴度的copy缺陷型（E1和E3缺失）腺病毒的生產(chǎn)，以進行外源基因的表達。腺病毒感1染幾乎所有的細胞類型，除了一些抗腺病毒感1染的淋巴1瘤細胞。腺病毒是研究原代非增殖細胞基因表達的zui佳系統(tǒng)，它可以使轉(zhuǎn)化細胞和原代細胞中得到的結(jié)果直接進行對比；不整合到染色體中，無插入致突變性。能有效進行增殖，滴度高：腺病毒系統(tǒng)可產(chǎn)生108 pfu/ml原液，濃縮后可達1010-1011 VP/ml，這一特點使它非常適用于基因cure。

位點特異性重組法

這類方法使用來源于噬菌體的重組酶，這類重組酶能夠識別特異性序列位點(長度數(shù)十堿基對至數(shù)百堿基對)并引發(fā)含有該位點的序列之間的重組；在腺病毒骨架和穿梭質(zhì)粒中添加重組酶能夠識別的特異性位點，在細胞內(nèi)表達對應的噬菌體重組酶或體外使用重組酶，介導骨架質(zhì)粒和穿梭質(zhì)粒之間的位點特異性重組，將目的基因引入骨架質(zhì)粒，形成帶有重組腺病毒基因組的腺病毒質(zhì)粒；轉(zhuǎn)染包裝細胞，進行病毒載體拯救。該方法進一步簡化了腺病毒質(zhì)粒的制備過程，它的缺限是在腺病毒基因組的某些部位不可避免的殘留了重組酶特異性識別位點。