低溫生物菌種的原理

菌種保藏有多種方法，其原理大多大同小異，主要是運用一些方式盡量降低生物體內(nèi)的代謝，達到延長生命，減少變異的目的。通常采用的方法為低溫、缺氧、干燥。

低溫主要對菌種產(chǎn)生兩方面的影響，首先，較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活，降低新陳代謝，達到保藏菌種的目的。其次，低溫同時會導致菌體誘發(fā)菌絲自溶機制，如果降溫過程失誤，同樣會造成機體的機械損傷和溶質(zhì)損傷。

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。

低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個因素而設(shè)計的。

菌種保藏的目的、原理及常用的方法有哪些？

保藏方法大致可分為以下幾種：

1．傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。

2．液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種存活率，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。

3．載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5．冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。

                                                       低溫生物菌種的冰凍是怎樣的？

生物體的新陳代謝是隨著溫度的降低而減緩的。如果低溫在0℃以上，這個減緩過程一般是可逆的，即溫度回升以后，新陳代謝的速度也隨之恢復。但如溫度降至冰點以下時，生物體常因結(jié)冰而發(fā)生不可恢復的損傷。因為所有的生物體體液都含有大量的水（一般在80%左右），細胞器也都懸浮于水溶液中，新陳代謝過程都是在水溶液或膜和水溶液的界面上進行的，所以在結(jié)冰的過程中，一方面由于水的晶體──冰晶硬度較大，對于生物體內(nèi)的精細結(jié)構(gòu)會造成機械損傷；另一方面由于水結(jié)冰，使細胞內(nèi)失去了大量可利用的水，造成脫水現(xiàn)象，從而使精細結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞。