{微生物}培養(yǎng)

——微生物培養(yǎng)——

指將微生物接種到培養(yǎng)基內(nèi)，經(jīng)一定條件使微生物生長繁殖。接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養(yǎng)基表面。②劃線法:用接種環(huán)沾取含菌材料，在固體培養(yǎng)基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養(yǎng)皿中，然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基，搖勻后冷卻凝固。④點(diǎn)植法:用接種針在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點(diǎn)。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進(jìn)入半固體深層培養(yǎng)基中。⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料，在液體培養(yǎng)基中洗下。培養(yǎng)方法則根據(jù)微生物對氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。需氧培養(yǎng)是指必須在有氧環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，必要時(shí)用振蕩或通氣攪拌達(dá)到充分供氧;厭氧培養(yǎng)是培養(yǎng)過程一直保持在少氧或無氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學(xué)、生物等辦法使培養(yǎng)容器內(nèi)的氧氣部分或全部消除。通常用抽真空方法，有時(shí)將兩種方法結(jié)合使用，使厭氧培養(yǎng)更為理想。接種、培養(yǎng)是食品微生物應(yīng)用、研究過程中基本和必不可少的方法。在進(jìn)行junzhong鑒定時(shí)，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。

{食品微生物}檢測——{大腸gan菌}

——大腸gan菌簡介——

    大腸埃希氏菌(Escherichia coli)通常被稱為大腸gan菌，是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的，在相當(dāng)長的一段時(shí)間內(nèi)，一直被當(dāng)作正常腸道菌群的組成部分，認(rèn)為是非致病菌。直到20世紀(jì)中葉，才認(rèn)識到一些特殊血型的大腸gan菌對人和動(dòng)物有病原性，尤其對嬰兒和幼畜(禽)，常引起嚴(yán)重腹瀉和壞血癥，它是一種普通的原核生物，根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸gan菌分為6類:腸致病性大腸gan菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸gan菌(ETEC)、腸侵襲性大腸gan菌(EIEC)、腸血性大腸gan菌(EHEC)、腸黏附性大腸gan菌(EAEC)和彌散粘附性大腸gan菌(DAEC).。大腸gan菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。此法即把少量的微生物接種在平板表面上，成等邊三角形的三點(diǎn)，讓它各自獨(dú)立形成菌落后，來觀察、研究它們的形態(tài)。

微生物限度檢查

1.平皿法

   平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和菌數(shù)測定，每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個(gè)平板。

   培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 除另有規(guī)定外，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在30～35℃培養(yǎng)3～5天，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板在20～25℃培養(yǎng)5～7天，觀察菌落生長情況，點(diǎn)計(jì)平板上生長的所有菌落數(shù)，計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級兩個(gè)平板的菌落數(shù)平均值不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。7、注射接種該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi)，如人或其它動(dòng)物中，常見的yimiao預(yù)防接種，就是用注射接種，接入人體，來預(yù)防某些疾病。

   菌數(shù)報(bào)告規(guī)則 需氧菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于300cfu的稀釋級、霉菌和酵母菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu的稀釋級，作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。取zui高的平均菌落數(shù)，計(jì)算1g、1ml或10c㎡供試品中所含的微生物數(shù)，取兩位有效數(shù)字報(bào)告。含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixedculture)。

   如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅zui低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1 時(shí)，以<1 乘以zui低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。