廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。Silica固相萃取柱分類

在選擇固相萃取機理時，應(yīng)根據(jù)目標化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機理，因為許多化合物同時具有多種功能基。例如：2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16)，它在一定 pH條件下也可呈陽離子態(tài)，同時它又具有疏水性和親水性的非極性官能團。此時，應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況，選擇有利于從干擾物中分離目標化合物的萃取機理。當樣品基質(zhì)中同時含有大量非極性干擾雜質(zhì)時，應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機制，而應(yīng)采用以 pKa以下兩個 pH單位或以 pH=2.16為限的陽離子交換機制。相反，如果樣品中同時含有大量干擾雜質(zhì)陽離子，則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高)，采用非極性萃取機制更為有利。

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骨架形狀，粒徑，孔徑

硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無定型C18材料具有較高的性能價格比，是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性，但相對價格可能稍高，可作為精制的選擇。

現(xiàn)在市場上可供選擇的填料粒徑很多，中低壓備通常是為了增大上樣量，增加流速，減小壓力而選用大粒徑填料；由于可以達到較高的柱效，因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時還應(yīng)充分考慮孔徑，分子量小于5000 da時選擇孔徑(80~120 da)，而對于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品，通常不采用C18分離模式，采用 SEC等模式進行分離。

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用溶劑的次序也會影響流動速度，如活化溶劑是二氯甲1烷，平衡溶劑是水，因為二氯甲1烷與水不互溶，活化平衡時間的流動速度較慢。因此，我們建議在兩種非互溶溶劑之間加入過渡溶劑甲1醇，這樣就能解決這個問題。

氣層效應(yīng)

氣層可以阻止液體流動，從而引起流速問題。氣層形成的主要原因是篩板或填料松動。商品產(chǎn)品通過運輸?shù)接脩羰种校谶\輸過程中，填與篩板之間發(fā)生位移、松動，很容易形成氣層。這個氣氣層有時會更明顯，能看出填充物有斷裂或縫隙。有時候松動并不明顯，使用小柱體時才能感覺到流速的不同。這樣，通過壓實篩板或使用正負壓將空氣排出即可解決輕微松動問

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固相萃取柱能否重復使用？

回答：理論上說，可以洗干凈后再使重復使用，因為在沖洗過程中不能保證完全沖洗干凈，其殘留物質(zhì)在下次使用可能會對被測物造成干擾，導致回收率和重現(xiàn)性差！

相同規(guī)格、不同品牌的固相萃取小柱樣做相同樣品為何回收率不同？

答：不同品牌的小柱雖然等效規(guī)格固定也一樣，但其填充源、接合技術(shù)、裝填工藝等因素都會造成樣品回收率的差異！

規(guī)范中規(guī)定某一品牌的固相萃取柱，是否可以用其它同一品牌的固相萃取柱代替？

回答：理論上都可以，但是有些時候所測定的基質(zhì)和物質(zhì)比較復雜，使用標準推薦的固相萃取小柱可能會獲得更好的回收率和重現(xiàn)性！

SPE小柱相極固定比流動相極性大的分離模式稱為正相模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用；極性力比非極性力強，但比離子力弱；常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力，因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結(jié)果表明： SPE正相萃取后，樣品基質(zhì)多為弱極性，如正己烷、二氯甲i烷、菜油等，而目標物多含有極性官能團。常用極性固定相包括：硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

GP-C18通用反相色譜柱特點：

利用高可控性的單分子層形成技術(shù)和封尾技術(shù)

*柱間重現(xiàn)率高

*選擇性和分離效i率高

適宜于分離酸性i、中性和堿性化合物，以及多種藥i物和多肽等

建議使用有i機溶劑或有i機溶劑/水系統(tǒng)的流動相。