廣州碩譜生物科技有限公司農(nóng)殘級弗羅里硅土SPE柱選擇

固相萃取操作中常見的問題

回收率低在一次完整的SPE操作中，目標化合物可能會存在于樣品溶液流出液、淋洗液、洗脫液或吸附劑中，當“目標物沒有回收或回收率低” 現(xiàn)象發(fā)生時，可向樣品溶液加入標液，然后進行完整的SPE操作并將樣品流出液、淋洗液和洗脫液分別收集并分析。

首先確定目標化合物存在于哪一部分，進而確定問題來自下列哪一環(huán)節(jié)：目標化合物在吸附劑上保留不足；目標化合物未被完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

由于許多化合物同時具有多種官能團，在選擇固相萃取機理時，應該根據(jù)目標化合物及干擾物的性質(zhì)來考慮采用哪種萃取機理較為有利。如：2-萘胺是一個弱堿性化合物（pKa=4.16），在一定的pH條件下還可以呈陽離子狀態(tài)，同時該化合物具有疏水的非極性官能團及親水的極性官能團。C18柱的主要官能團是十八烷基(octade-cyl),其主要作用力是非極性，第二作用力是極性、陽離子交換。這時，就應該根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況來選擇有利于將目標化合物與干擾物分離的萃取機理。如果樣品基質(zhì)中同時含有大量的非極性干擾雜質(zhì)，就應該避免采用非極性的萃取機理，而將樣品的pH調(diào)節(jié)到低于其pKa兩個pH單位，即pH=2.16，并采用陽離子交換機理。反之，如果樣品中同時含有大量的陽離子干擾雜質(zhì)，則應該調(diào)節(jié)樣品的pH至6.16（高于pKa兩個單位），采用非極性萃取機理較為有利。

常見反相鍵合硅膠吸附劑的類型

C2柱

C2柱的官能團是乙1基( ethyl)。其主要作用力是非極性、極性，第二作用力是陽離子交換。SPE小柱填料充填壓實后，形成柱床，當溶劑流過小柱時，速度過快會產(chǎn)生兩個問題：一是對粘結(jié)相填料而言，由于流速過快，使其不能充分浸潤舒展，從而使其保持活性降低。因為C2的碳鏈十分短，使得硅膠上的硅羥基(Si-OH)較為暴露在吸附劑表面，從而導致C2具有相當顯著的極性特點。在實際應用中，如果目標物在C8或C18上吸附作用太強，可用C2來取代。C2的極性作用力比CN的略強。

什么是SPE柱SPE柱是在分析前處理中，用于凈化樣品的一種色譜耗材，由于樣品處理液中經(jīng)常會有大量的雜質(zhì)（樣品基質(zhì)），因此對分析結(jié)果可能會造成較大的影響，因此針對待測化合物的特性，選擇適當?shù)腟PE柱能有效凈化樣品中的雜質(zhì)。

SPE柱的類型

SPE柱的凈化原理是根據(jù)待測化合物和雜質(zhì)在柱中填料的保留能力差異，起到分離的作用，這也是色譜的重要原理之一。

通常，根據(jù)待測化合物和填料之間作用力的不同，SPE柱的填料大致分為幾個類型，離子交換、HLB（脂性二乙烯苯和親水性N-乙烯基吡咯烷酮）、C18、硅膠、弗羅里硅土、中性氧化鋁等，而作用力大致包括離子鍵、氫鍵和范德華力。廣州碩譜生物科技有限公司農(nóng)殘級弗羅里硅土SPE柱選擇SPE小柱的應用提示1、根據(jù)分析目標物的理化性質(zhì)選擇合適的SPE柱。根據(jù)不同的作用力，SPE可選擇吸附待測化合物或者雜質(zhì)。

實際的應用

可以說， SPE柱的原理和應用相當廣泛，今天小編就以乳制品中三聚1氰胺的測定為例，做了一個小小的實驗，參考 GB/T 22388-2008原乳及乳制品中三聚1氰胺的測定方法二[1]。這種次生相互作用對于提取或保留強極性物或污染物十分有用，但對分析物的吸附也可能是不可逆轉(zhuǎn)的。該實驗采用了陽離子交換 SPE柱(PCX)，因為三聚1氰胺在化學結(jié)構(gòu)上有三個胺基-NH2，因而更容易離子化。

本試驗用三聚1氰胺溶液在嬰幼1兒奶粉di一段中加入1.0 mg/kg，經(jīng)處理后在液態(tài)溶液中測定，多次檢測結(jié)果為0.8~0.9 mg/kg，經(jīng)過多次洗滌、淋洗后，多次使用，結(jié)果為0.6~0.7 mg/kg。

正相作用機理

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要是利用：

固相萃取材料極性表面與目標物極性官能團之間的極性相互作用。極性作用力的強度比非極性作用力要大，但比離子作用力小。4、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質(zhì)從吸附劑上洗脫下來并收集。常見的極性官能團包括羥基、胺基、巰基等。弱極性的基質(zhì)環(huán)境有利于極性作用力的形成，因為弱極性溶劑沒有能夠與極性固定相形成氫鍵的官能團。因此，在SPE的正相萃取中，樣品基質(zhì)多為弱極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標物大多含有極性官能團。

固相萃?。⊿PE）技術(shù)做為樣品處理的一種重要的方法廣泛應用于臨床醫(yī)學、制藥、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。

實驗室中常用的固相萃取常用方法：

? 重力

? 價格便宜，速度慢，完全靠重力沒法保證結(jié)果的一致性

? 真空抽濾

? 常用的方法（目前）

? 不支持高1性能的柱子（微粒經(jīng)填料）

? 不適用粘稠樣本和粘性樣品

? 流速不均一

? 離心

? 不常規(guī)，不適用于體積超過100微升的樣品

? 正壓

? 變得越來越普遍

? 流速方便控制且均一

? 提供更高的壓力

? 更容易實現(xiàn)自動化

柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢？原來也討論過這個問題，我也拆下來清洗過，但我看到柱前段的污染更甚，于是就用刀片刮了刮，然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了，但使用壽命會不會減少呢？

答：柱頭污染了，就取出污染的，再裝一些填料。因為加入你刮了些填料，那么微觀的塔板數(shù)就少了。假入你刮得不多，僅表面，可能就是一些臟物，所以，問題解決。但是今后還會有同樣問題，再掛，那么不小心刮，影響柱效。建議還是裝一個預柱。