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發(fā)布時間：2021-03-22 19:21
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儀器介紹：高通量組織研磨儀 [1]高通量組織研磨儀的亮點在于較大限度的操作便捷性和安全性。6)啟動研磨儀對樣品進(jìn)行研磨（根據(jù)不同的樣品，本身性質(zhì)不同，需要對研磨頻率和研磨時間進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整）。由于采用了集成電機(jī)開關(guān),因此只有當(dāng)機(jī)蓋處于閉合狀態(tài)下儀器才能啟動。獨有的Easy Clamp系統(tǒng),可輕松安全地緊固較大體積為100ml的研磨罐。為了滿足食品和制藥行業(yè)的要求，高通量組織研磨儀的Easy Clamp系統(tǒng)和擺臂由的不銹鋼制成,外殼材質(zhì)同樣為不銹鋼。新型電機(jī)的應(yīng)用以及電機(jī)直接傳動使得高通量組織研磨儀維護(hù)十分方便。
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組織研磨儀進(jìn)行操作的基本流程如下：
1. 將菠菜組織樣本分裝到合適的離心管內(nèi)；
2. 在離心管內(nèi)添加適量裂解介質(zhì)；
3. 添加一定量的溶劑；
4. 將離心擰緊蓋子，本插入適配器中；
5. 再使用適配器放置到高通量組織研磨儀，并擰緊固定手柄；
6. 設(shè)置研磨速度和時間，啟動開關(guān)；
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DNA的粗提
1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻；
2) 冷卻后加入等體積：易戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min；
3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）；
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中；
5) （根據(jù)需要可用氯放：易戊醇如上法重復(fù)抽提一次，吸取上清）；
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀DNA；
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇；
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次；
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明，不要過度干燥；
11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量組織研磨儀對要進(jìn)行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于：研磨過程中，不會對植物組織造成破壞，可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨，封閉式的樣品管，避免樣品交叉污染。
