親和柱介紹

生物分子之間的親和識(shí)別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用，這些親和作用屬于生物專一性識(shí)別；此外，某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用，如染料和某些酶（特別是脫氫酶和激酶等），植物凝集素和糖蛋白，金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用，都可以應(yīng)用于親和分離過程。

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親和柱的應(yīng)用

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◆ 食品、飼料中真菌的測(cè)定：見相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（如GB 5009系列的真菌測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方法）、其他行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)等。

◆ 中藥材中真菌的測(cè)定：如《中國(guó)藥典》2020版 通則2351 真菌測(cè)定法，品種正文中黃曲霉、玉米赤霉烯酮檢查項(xiàng)。

◆ 食品中農(nóng)殘、營(yíng)養(yǎng)成分等其他檢測(cè)項(xiàng)目。

親和柱的測(cè)定原理

親和柱，吸附力高柱容量大，適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結(jié)合使用，定量檢測(cè)DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理，提高了樣品的純度，純化后的提取液可用不同的分析方法測(cè)定。

測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原反應(yīng)，抗嘔吐毒素(DON)的連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上，樣品中的DON經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后將樣品提取液緩慢通過DON親和柱，在親和柱內(nèi)，DON與結(jié)合，洗滌液通過親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。之后洗脫DON，然后進(jìn)行相關(guān)分析。

親和柱——親和層析的應(yīng)用

抗原和利用抗原、之間高特異的親和力而進(jìn)行分離的方法又稱為親和層析。例如將抗原結(jié)合于親和層析基質(zhì)上，就可以從中分離其對(duì)應(yīng)的。在蛋白質(zhì)工程菌發(fā)酵液中所需蛋白質(zhì)的濃度通常較低，用離子交換、凝膠過濾等方法都難于進(jìn)行分離，而親和層析則是一種非常有效的方法。將所需蛋白質(zhì)作為抗原，經(jīng)動(dòng)物后制備，將與適當(dāng)基質(zhì)偶聯(lián)形成親和吸附劑，就可以對(duì)發(fā)酵液中的所需蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化?？乖?、間親和力一般比較強(qiáng)，其解離常數(shù)為108－10?12M，所以洗脫時(shí)是比較困難的，通常需要較強(qiáng)烈的洗脫條件?？梢圆扇∵m當(dāng)?shù)姆椒ㄈ绺淖兛乖⒎N類或使用類似物等來(lái)降低二者的親和力，以便于洗脫。

另外金黃色球菌蛋白A（ProteinA）能夠與球蛋白G（IgG）結(jié)合，可以用于分離各種IgG。