樣液制備

1、選取有代表性的果蔬除去泥土，葉菜類取葉片/瓜果取皮，剪成1cm見方大小。

2、葉菜類稱取2g（瓜果類取4g），放入樣品瓶后加10mL緩沖液，振蕩2分鐘。

3、倒出提取液澄清3-5分鐘(渾濁或葉綠素多的樣液則直接用濾紙過濾)。

四、檢測(cè)步驟

1、儀器開機(jī)后進(jìn)入待測(cè)界面預(yù)熱。

2、取一支試管加2.5mL緩沖液做空白對(duì)照，其余試管則分別加2.5mL樣液。

3、分別加入100μL酶、100μL顯色劑，振蕩后37℃恒溫培養(yǎng)10分鐘。（如果無條件加溫培養(yǎng)也可在20℃以上的環(huán)境中放置15分鐘）

4、再分別加入100μL底物振蕩后倒入比色皿，立即放入儀器檢測(cè)（對(duì)照放通道）。

5、儀器自動(dòng)完成檢測(cè)程序并打印出檢測(cè)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)回收率一般在70%-120%之間。在歐盟，使用SIM模式要求每個(gè)目標(biāo)物至少有2個(gè)大于m/z200或3個(gè)大于m/z100的特征離子;目標(biāo)物特征離子比例與標(biāo)準(zhǔn)品相比處于70%-130%即可;日常檢測(cè)回收率控制在60%-140%，確證分析則需要在70%-110%之間。

但是傳統(tǒng)的GC/MS等農(nóng)殘分析技術(shù)檢測(cè)成本高、時(shí)間長(zhǎng)，這就給食品安全監(jiān)管部門對(duì)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后的監(jiān)督工作帶來了許多不便，因此也催生出大量的快速農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)，常見的有化學(xué)速測(cè)法、分析法、酶抑制法和檢測(cè)法等。

(1)化學(xué)速測(cè)法，主要根據(jù)氧化還原反應(yīng)，水解產(chǎn)物與檢測(cè)液作用變色，用于有機(jī)磷農(nóng)藥的快速檢測(cè)，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質(zhì)干擾。

(2)分析法，主要有分析和酶分析，的是酶聯(lián)分析(ELISA)，基于抗原和的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)，對(duì)于小分子量農(nóng)藥需要制備人工抗原，才能進(jìn)行分析。

農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的選擇

① 農(nóng)藥的理化特性、分析任務(wù)的要求、樣品的性質(zhì)及樣品來源;

② 單殘留或多殘留方法;

③ 殘留限量、方法檢測(cè)限以及方法總誤差;