問：如何存儲(chǔ)PHENODRIVE？

答：PHENODRIVE以凍干粉末形式進(jìn)行銷售,可方便地在水溶劑中進(jìn)行重組。凍干粉末可在4°C下保存至少6個(gè)月, 重組的溶液可在 -20°C 下保存并在冷凍后3個(gè)月內(nèi)使用。

問：如何使用PHENODRIVE對(duì)培養(yǎng)支架進(jìn)行涂布？

答：應(yīng)準(zhǔn)備適當(dāng)容量的移液管以確保足夠量的重組溶液,所需的體積可根據(jù)支架的尺寸、孔隙率、化學(xué)成分和膨脹特性決定 (如使用乙醇, 支架可能會(huì)暫時(shí)膨脹, 同時(shí)應(yīng)考慮與支架物理化學(xué)特性相關(guān)的因素)。

PHENODRIVE凍干粉末如何重組？

由于PHENODRIVE 是以無菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲(chǔ)的, 因此在使用時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行重組。首先，在制備有機(jī)納米纖維方面，用于靜電紡絲的天然高分子品種還十分有限，對(duì)所得產(chǎn)品結(jié)構(gòu)和性能的研究不夠完善，最終產(chǎn)品的應(yīng)用大都只處于實(shí)驗(yàn)階段，尤其是這些產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)還存在較大的問題。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)需求,取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中, 這個(gè)過程非常簡(jiǎn)單, 待其溶解后得到無色、透明液體經(jīng)過濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) , 這一過程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個(gè)月。

重組溫度: 室溫即可;

重組環(huán)境: 推薦有紫外線照射滅菌的環(huán)境;

過濾孔徑: 0.22um;

溶液要求: 用于溶解PHENODRIVE的溶液PH值建議約7.4;

重組濃度: 建議范圍 0.01mg/ml ~0.1mg/ml, 通常濃度越高對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞表型的影響、控制時(shí)間越久, 0.01mg/ml的濃度影響、控制時(shí)間約3天, 而0.1mg/ml的則可以達(dá)到15天;

利用PHENODRIVE重組溶液對(duì)細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的應(yīng)用：

       溶解待培養(yǎng)細(xì)胞類型的無組織培養(yǎng)基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步驟配置適當(dāng)濃度的重組透明重組溶液,再將從組后的溶液與細(xì)胞懸浮液混合, 以達(dá)到0.001% ~1%（V/V）的終 PHENODRIVE 濃度。⑤靜電紡納米纖維具有較高的比表面積和孔隙率，可增大傳感材料與被檢測(cè)物的作用區(qū)域，有望大幅度提高傳感器性能。細(xì)胞懸浮液的典型細(xì)胞濃度是40000個(gè)/ml ~1000000個(gè)/ml。

PHENODRIVE凍干粉末的使用方法：

       與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基質(zhì)膠相比, 我們的合成基質(zhì)膠使用過程極為簡(jiǎn)單, 在室溫下即可實(shí)現(xiàn)重組使用, 這里就 PHENODRIVE的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用流程介紹如下:

       由于PHENODRIVE 是以無菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲(chǔ)的, 因此在使用時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行重組。1934年，F(xiàn)ormalas發(fā)明了用靜電力制備聚合物纖維的實(shí)驗(yàn)裝置并申請(qǐng)了專利，其專利公布了聚合物溶液如何在電極間形成射流，這是詳細(xì)描述利用高壓靜電來制備纖維裝置的專利，被公認(rèn)為是靜電紡絲技術(shù)制備纖維的開端。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)需求,取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中, 這個(gè)過程非常簡(jiǎn)單, 待其溶解后得到無色、透明液體經(jīng)過濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) , 這一過程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個(gè)月。

       對(duì)于這類耗材表面的涂布應(yīng)用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中, 按要求的濃度進(jìn)行重組, 將經(jīng)過濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)（建議紫外線照射的無菌環(huán)境下）, 待溶劑蒸發(fā)盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,即完成涂布的過程。通過設(shè)計(jì)不同的收集裝置，可以獲得單根纖維、纖維束、高度取向纖維或無規(guī)取向纖維膜等。

建議：在無情況下種植細(xì)胞, 待細(xì)胞粘附后再添加, 比如在細(xì)胞種植3小小時(shí)后。

       如果采用乙醇溶液進(jìn)行重組, 應(yīng)確保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重組步驟, 然后用移液器移取足夠的重組溶液將支架完全覆蓋, 同樣采用自然蒸發(fā)的方法在支架的表面及空期間形成一層透明的薄膜。

       溶解待培養(yǎng)細(xì)胞類型的無組織培養(yǎng)基中的PHENODRIVE, 方法是按照粉末步驟配置適當(dāng)濃度的重組透明重組溶液,再將從組后的溶液與細(xì)胞懸浮液混合, 以達(dá)到0.001% ~1%（V/V）的終 PHENODRIVE 濃度。靜電紡絲技術(shù)的應(yīng)用隨著納米技術(shù)的發(fā)展，靜電紡絲作為一種簡(jiǎn)便有效的可生產(chǎn)納米纖維的新型加工技術(shù)，將在生物醫(yī)用材料、過濾及防護(hù)、催化、能源、光電、食品工程、化妝品等領(lǐng)域發(fā)揮巨大作用。細(xì)胞懸浮液的典型細(xì)胞濃度是40000個(gè)/ml ~1000000個(gè)/ml。