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發(fā)布時間:2020-11-07 07:15  
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無論是生物制藥大規(guī)模分離純化還是藥l物分析、食品檢測、環(huán)境監(jiān)測、石油化工產品質量控制、生命科學研究等都離不開色譜技術。色譜填料是色譜系統(tǒng)的心臟,因此被譽為色譜“芯”。改革開發(fā)以來,中國色譜領域的基礎研究取得突飛猛進的進步,發(fā)表文章數(shù)量位居世界第l一,但中國無論是用于工業(yè)分離純化還是實驗室分析檢測的色譜填料和色譜柱基本依賴進口,中國色譜產業(yè)長期處于缺“芯”狀況。而且?guī)缀跛兄卮笊V理論的創(chuàng)建,新的色譜分離分析模式的建立,新型色譜填料技術的發(fā)明,及關鍵產業(yè)化技術突破都與中國14億人口無關。這對于擁有l多色譜領域專職研究人員,色譜文章多年位居世界第l一的國家來說是比較尷尬的。納微科技將給大家講解納微科技是如何去破l解這一局面。
為了滿足越來越復雜樣品的高l效、快速分離和分析的需求,硅膠色譜填料的制備技術在不斷進步和創(chuàng)新。從早形貌不規(guī)則的無定形硅膠發(fā)展到球型硅膠;從粒徑分布寬的多分散球型硅膠發(fā)展到粒徑高度均一的單分散球型硅膠;從全多孔球型硅膠發(fā)展到表面多孔核殼結構硅膠;從金屬雜質含量高的A型硅膠發(fā)展到超純的B型硅膠;從不耐堿的純硅膠基質發(fā)展到耐堿的有機雜化硅膠;從相對單一的鍵合相到更加多樣化的鍵合相硅膠色譜填料。每一次硅膠材料制備技術的進步都促進了硅膠色譜分離分析性能的進一步提升,并拓展其應用范圍。
硅膠表面修飾和功化制備技術發(fā)展歷程:
硅膠基球是硅膠色譜填料發(fā)展的基礎,硅膠性能的改善是源于對硅膠顆粒形貌結構、粒徑大小、粒徑分布、孔道結構、比表面積等的控制能力提高。硅膠表面改性和功能化是色譜分離模式賴以建立的基礎,其功能基團性質、種類、及密度會影響其分離的選擇性。隨著HPLC 應用領域越來越廣,硅膠表面功能化種類也越來越多,且硅膠基球表面富含具有反應活性的硅羥基,因此可以通過化試劑與表面硅羥基反應引入不同的功能基團,以制備不同分離模式的色譜填料。
反相色譜是比較常用的色譜分離模式,占到了全部分析色譜的70%左右。通常只需優(yōu)化流動相組成就可實現(xiàn)對大多數(shù)有機化合物和多肽的分離分析。反相硅膠色譜填料的制備方法比較簡單,主要是通過硅膠表面羥基與帶不同烷l基鏈或試劑鍵合。其中C4、C8和C18 硅膠鍵合相是使用比較廣泛的反相色譜填料。反相色譜填料的研究是朝著柱效高、重現(xiàn)性好、分析速度快、制備方法簡單、硅羥基掩蔽完全、選擇性好、pH使用范圍寬、壽命長等目標進行。反相硅膠色譜填料發(fā)展主要是兩方面:一方面是制備越來越豐富的鍵合相以滿足HPLC 越來越廣的分離選擇性的要求;另外一方面是解決反相色譜填料表面殘留硅羥基帶來拖尾、pH適用范圍受限、及使用壽命短等問題。反相色譜填料制備的過程中, 由于位阻原因,硅膠表面的硅羥基不可能全部與試劑反應,殘留的硅羥基在反相分離過程中會與極性分子形成非特異性吸附,導致l極性化合物尤其是堿性化合物色譜峰變寬,甚至嚴重拖尾,柱效下降等。另外殘留硅羥基還會影響硅膠色譜填料的耐酸堿性,并限制其pH使用范圍,縮短填料使用壽命。因此開發(fā)有效封尾(封端)技術以減少或消除殘留硅羥基從而改善反相色譜填料性能是色譜填料研究的重要方向之一。另外在封端過程中引進帶正電荷的功能基團也可以屏蔽硅羥基對堿性化合物非特異吸附。