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發(fā)布時間:2020-12-21 04:52  

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PCR實驗室建設后的質量控制存在缺陷

實驗室的質量控制分為:室內(nèi)質量控制和室間質量控制。

室內(nèi)質量控制是指實驗室人員通過一定的步驟方法對實驗室工作的可靠性進行持續(xù)評估,旨在監(jiān)控常規(guī)實驗室工作的精度,提高實驗室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗的一致性,以確定測定結果是否可靠及可否發(fā)出報告的一項工作。

實驗室間質量控制是指客觀比較實驗室測量結果與目標值之間的差異,并由外部機構采取一定措施方法對實驗室結果進行持續(xù)、客觀的評價。






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PCR實驗室也是基因擴增實驗室,主要功能是擴增病毒中所含的基因,檢測含量低的感ran者是否含有特異性的病毒。傳統(tǒng)PCR實驗室平面布局為四個工作區(qū),即試劑制備區(qū)、樣品制備區(qū)、基因擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū),氣流設置無負壓要求。TMOON移動新冠PCR實驗室建設在傳統(tǒng)PCR實驗室建設的基礎上,合并了基因擴增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū),稱為擴增分析區(qū),根據(jù)《醫(yī)學生物安全二級實驗室建筑技術標準》T/CECS662G20要求,擴增分析區(qū)生物安全實驗室等級要求為二級,防護等級為三級,氣流需要按照負壓模式。

由于新冠病毒的肆nue,這種實驗室的建設就顯得尤為重要了,它可以為醫(yī)學人員的相關研究提供有力的保障!







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PCR實驗的污染來源都有哪些?

樣本間交叉污染:收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴導致外溢;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散,相互交叉污染。

實驗試劑污染:主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因為PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也充滿污染風險。

擴增產(chǎn)物污染:大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋,這是PCR反應中主要、常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。





PCR實驗室需要的儀器設備

試劑準備區(qū):冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機等。標本制備區(qū):生物安全柜、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等。擴增區(qū):核酸擴增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機、可移動紫外燈、配備UPS電源。分析區(qū):加樣器和水浴箱等。

污染的預防與控制

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。常見的有以下幾種污染類型:擴增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。要避免污染,首先應是預防,而不是排除。