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發(fā)布時間:2021-01-17 08:13  
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山西東勝科星實驗室設備有限公司專業(yè)從事:PCR實驗室、潔凈室、無菌室、實驗室家具、實驗室凈化工程設計、生產(chǎn)、銷售、安裝和售后為一體的專業(yè)化公司。
PCR實驗室平面布局
1)實驗室區(qū)域設置原則
1、 試劑儲存和準備區(qū)
2、 標本制備區(qū)
3、 擴增反應混合物配制和擴增區(qū)
4、 擴增產(chǎn)物分析區(qū)
5、緩沖區(qū)
2)各工作區(qū)域必須有明確的標記,避免不同工作區(qū)域內的設備、物品混用。
3)進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,即試劑儲存和準備區(qū)--<標本制備區(qū)—>擴增反應混合物配制和擴增區(qū)—>擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應通過傳遞窗進行。
4)不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出。
PCR實驗室的污染來源:
1.實驗試劑污染
主要是在PCR組分試劑加樣過程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中,因為PCR試劑對溫度十分敏感,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也是充滿了污染的風險的。
2.擴增產(chǎn)物污染
大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋,這是PCR反應中主要常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可形成假陽性。
PCR實驗室的防污染方法
按照實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序,所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008)。
嚴格執(zhí)行各區(qū)功能劃分
試劑儲存和準備區(qū):貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。
標本制備區(qū):核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作,應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規(guī)范的要求。
擴增區(qū):DNA合成、DNA擴增及檢測。
擴增產(chǎn)物分析區(qū):擴增片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性液相分析、測序等。
試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)和擴增區(qū)內的實驗用品,包括移液器等器具應專用,空氣、物品流向依次為:試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū),不可逆行。