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發(fā)布時間:2021-06-05 02:45  
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廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。mcx固相萃取柱批發(fā)
劑時值;
洗滌液通道和柱子,有溫度控制,加熱到30攝氏度容易沖洗;
長期使用緩沖液應(yīng)注意觀察接頭處是否有析出,如有白鹽析出,用10%硝i酸定期沖洗液路(取出柱子,沖洗30 mL10%硝i酸溶液,再用5倍水沖洗)可避免液路堵塞;
選用緩沖液要使用可靠的試劑,避免不純鹽引起不必要的麻煩;過渡流動相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動相相同,但溶液中不含緩沖鹽。
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對由非極性力吸附到反相 SPE柱上的目標(biāo)物,可用弱極性溶劑洗脫,如氯i仿、環(huán)己i烷、乙i酸乙i酯等。只有當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大時,才能使目標(biāo)物與吸附劑之間的范德華力破壞,使目標(biāo)物從 SPE柱洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲i醇,對許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候,單種溶劑無法徹底洗脫疏水性強(qiáng)的目標(biāo)物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。
反相模式下,溶劑體系的極性應(yīng)以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減,并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標(biāo)物,所選擇的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下,zui大限度地洗脫干擾物,所選洗脫劑應(yīng)能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。
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聚乙烯醇小柱活化平衡的目的有二,一是使官能團(tuán)填料的粘附性和伸縮性保持對目標(biāo)化合物的大吸附活性,另一種目的是去除填料本身可能引入的雜質(zhì)。硅膠鍵合C18,是一種在硅膠微球表面粘結(jié)的疏水性C18官能團(tuán),為使其對目標(biāo)物保持充分吸附活性,需要在濕潤環(huán)境上樣物在填料表層形成的液膜(活化平衡)與上樣物的溶劑分子具有良好的相容性,目標(biāo)物在膜間進(jìn)行傳質(zhì),與膠接C18發(fā)生疏水作用時,目標(biāo)物與膠接C18本身并不具有水浸潤性,直接上樣物,C18蜷縮,而較強(qiáng)的疏水性則使其難以與目標(biāo)物中的目標(biāo)物分子充分接觸,因此, HLB小柱采用聚合物改性材料,增加了親水基團(tuán),使其在上樣物的環(huán)境中與目標(biāo)物分子充分接觸,而發(fā)生傳質(zhì),使目標(biāo)物在上樣物的環(huán)境中完全保留。
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反相萃取通常用于化合物的預(yù)處理,正如反相色譜是色譜中常用的分離方法一樣,反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液,除去水分后,可方便地進(jìn)行干燥、濃縮。
有些項目,在淋洗步驟完成后,直接用一定量的洗脫液,如1 ml洗脫,這個過程中洗脫和定容集是一步處理,前一步處理必然會影響洗脫步驟的定量結(jié)果。
也就是溶劑互溶問題,當(dāng)淋洗過程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑極性的差別較大時,就會產(chǎn)化分層,洗脫阻力大,洗脫液容易被稀釋等問題,造成洗脫效果不同,從而導(dǎo)致試驗結(jié)果。
固相萃取小柱 SPE工藝的基本步驟:
上樣:將預(yù)處理過的樣品倒入活化的 SPE小柱中,然后采用加壓、抽真空或離心等方法,使液體樣品在 SPE小柱中以適當(dāng)速度流過。淋洗:選擇強(qiáng)度適中的混合溶劑,在可能情況下清洗去除干擾組分,而不會導(dǎo)致目標(biāo)萃取物流喪失;洗脫:用小體積的適當(dāng)洗脫溶劑洗脫和收集分析物;將干燥溶劑備用或直接在線分析。
洗脫劑的強(qiáng)度選擇非常重要,要達(dá)到分析物盡可能地被洗脫而吸附比分析物強(qiáng)的雜質(zhì)仍然留在 SPE小柱上而不被洗脫的效果。
選用 SPE柱規(guī)格的原則是,首先要確保 SPE柱的填料具有足夠的容量,以便將目標(biāo)化合物100%保留在柱體上。另外,填料也不易過量。
填充物越多,溶劑對目標(biāo)化合物的洗脫效果就越好。所以在選擇 SPE柱規(guī)格時,一定要考慮 SPE柱的容量。柱容是指一單位質(zhì)量的填料以主要力保持其質(zhì)量。
鍵合型硅膠柱容量一般為1%~5%。例如, SPE柱的填料為100 mg,其大容量一般不超過5 mg。該離子交換劑柱容量約為0.5~1.5 meq/g。