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固相萃取柱分類誠(chéng)信企業(yè)推薦「碩譜生物」

發(fā)布時(shí)間:2021-07-31 15:14  

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在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí),可利用極性相互作用,選擇正相萃取方式;而在極性樣品環(huán)境下,則可采用反相萃取方式。采用陽離子交換機(jī)制,可將萃取過程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位,即 pH=2.16。研究發(fā)現(xiàn),保留機(jī)制的選擇主要受以下幾個(gè)因素的影響:保留機(jī)制一:目標(biāo)物官能團(tuán)的性質(zhì);保留機(jī)制二:樣品基質(zhì)的性質(zhì)。

SCX (強(qiáng)陽離子交換)是一種以單分散型、無孔聚合物微球?yàn)檩d體的高i效離子交換色譜柱,用于快速、高i效地分離分析蛋白質(zhì)和多肽。

該 SPE色譜柱具有用于無極性和中度極性化合物的高保性烷i基合成相。

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離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物,其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的,例如水溶液,也可以是非極性的有機(jī)溶液,但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多,如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。

所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列任何一種或多種官能團(tuán),才能通過離子力從樣品溶液中分離出來:(1)可產(chǎn)生陽離子的官能團(tuán)(帶正電荷)(2)可產(chǎn)生陰離子的官能團(tuán)(帶負(fù)電荷),而待分析的目標(biāo)化合物必須在特定 pH環(huán)境下呈離子化或中性化。



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SPE小柱和色譜柱之間的一個(gè)區(qū)別是, SPE是一次性消耗品,在耐受溶劑范圍之外,短時(shí)間的溶劑洗滌對(duì)小柱的保留特性幾乎沒有影響,而且不會(huì)造成保留的顯著差異,因此它使用的 pH值范圍較寬,一般可在pH值范圍1-10之間使用,而不會(huì)造成結(jié)果的差異。

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固相萃取(Solid Phase Extraction,簡(jiǎn)稱 SPE)是一種將選擇性保留、選擇性洗脫等過程結(jié)合在一起的分離技術(shù)。

在通過吸附劑(Sorbent)處理復(fù)雜樣品時(shí),吸附劑通過極性作用、疏水作用或離子交換等作用力,選擇性地保留了目標(biāo)物質(zhì)(Aimed Compound)和少量與目標(biāo)物質(zhì)性質(zhì)相似的組分,而其它組分則通過吸附劑流出小柱,然后以另一種溶劑體系選擇性地洗脫目標(biāo)物質(zhì),實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)物質(zhì)的分離、提純和富集。

固相萃取過程中,“保留”和“洗脫”都受到目標(biāo)物、吸附劑和溶劑三個(gè)因素的影響,對(duì)于給定的目標(biāo)物,選擇合適的吸附劑、樣品溶劑和洗脫溶劑是成功分離的關(guān)鍵。




當(dāng)選用柱狀規(guī)格時(shí),必須考慮到目標(biāo)化合物和在萃取條件下可能吸附的總干擾物,而不僅僅是目標(biāo)化合物。另外,即使目標(biāo)化合物未超過柱容量, SPE柱在保留目標(biāo)化合物的同時(shí)也保留了部分干擾物,由于兩者的總量已超過柱容量,其結(jié)果必然是部分目標(biāo)化合物無法保留在 SPE柱中。

預(yù)處理溶劑和參數(shù)的選取:

確定預(yù)處理 SPE柱所用溶劑及其用量和流速,并進(jìn)行平衡。在反相或離子交換柱中,通常以或極性為預(yù)處理溶液,以水或緩沖溶液為平衡溶液。

樣本過柱流速度的選擇:下一步是確定樣品通過 SPE柱流動(dòng)速度。過柱流速與 SPE試樣中填充物的粒徑分布、填充物的填充密度、目標(biāo)化合物與試樣基質(zhì)的結(jié)合程度、試樣的粘度等因素有關(guān)。