傳統(tǒng)結(jié)晶板蛋白質(zhì)晶體板比較

在20℃時雖然微流控芯片上的結(jié)晶條件數(shù)少于24孔結(jié)晶板(67 vs 94),但主要是嗜熱菌蛋白酶的結(jié)晶條件數(shù)顯著減少,其他4種蛋白在兩種方法上均有相近的結(jié)晶條件數(shù),表明微流控芯片能以接近24孔結(jié)晶板的效率進行蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選.但是,在4℃時微流控芯片與24孔結(jié)晶板有60%的結(jié)晶條件不同,20℃時有90%的結(jié)晶條件不同,這表明目前的這種微流控芯片還不能直接代替?zhèn)鹘y(tǒng)的24孔結(jié)晶板,它可以作為蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選時的一種補充方式。

蛋白結(jié)晶板

為滿足固相時間分辨熒光分析(TRFIA)研究需要,采用固相載體改進技術(shù)研制用于檢測系統(tǒng)的聚微孔板,不僅提高TRFIA系統(tǒng)的靈敏度,而且可以把該技術(shù)應(yīng)用到其他分析技術(shù)、生物芯片技術(shù)、污水處理、發(fā)酵工藝、酶工程和親和層析,具有重要的現(xiàn)實意義。本文將聚微孔板內(nèi)表面固相功能化,研制一種在聚微孔板內(nèi)表面形成耐受強酸、強堿、的尼龍-6膜層,并在膜層表面化得到活性基團與己二酸二酰肼進行“手臂”連接,用雙功能基團活化,活化后的膜層與蛋白質(zhì)具有很高的連接性能和穩(wěn)定性。

蛋白結(jié)晶板使用

主要表現(xiàn)在2個方面:一是在傳統(tǒng)結(jié)晶方法和試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一系列新的的結(jié)晶技術(shù)和篩選試劑盒;二是從生物學,物理學和化學等角度提出的一些提高結(jié)晶篩選效率的新技術(shù),主要包括通過分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的穩(wěn)定和均一性,導(dǎo)入籽晶,共結(jié)晶,改善結(jié)晶界面和變溫篩選等技術(shù).展望了該領(lǐng)域未來的發(fā)展趨勢。