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發(fā)布時間:2020-12-31 05:54  

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在一定條件下,有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對動物介質(zhì)膽jian堿酯酶正常功能有抑制作用,從而達(dá)到殺蟲目的,其抑制率與農(nóng)yao藥的濃度呈正相關(guān)。酶抑制法,是研究最成熟、應(yīng)用最廣泛的快速農(nóng)殘檢測技術(shù),主要根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。正常條件下,膽jian堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計或農(nóng)殘測試儀在412nm處測定吸光度的變化值(△A),計算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥殘留的存在。酶活力:空白對照1分鐘(3分鐘)吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3(0.3-0.8)之間。


分析法,主要有分析和酶分析,常用的是酶聯(lián)分析(ELISA),基于抗原和抗ti體的特異性識別和結(jié)合反應(yīng),對于小分子量農(nóng)yao藥需要制備人工抗原,才能進行分析。酶抑制法,是研究成熟、應(yīng)用廣泛的快速農(nóng)殘檢測技術(shù),主要根據(jù)有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。薄層色譜法(ThinLayerChromatogra2phy,TLC)是一種較成熟的、應(yīng)用也較廣的微量快速檢測方法,20世紀(jì)60年代色譜技術(shù)的發(fā)展,使薄層色譜法在農(nóng)yao藥殘留分析中得到廣泛應(yīng)用。檢測法,主要利用生物對農(nóng)yao藥殘留的敏感反應(yīng),例如給家蠅喂食樣品,觀察率來判定農(nóng)殘量。該方法操作簡單,但定性粗糙、準(zhǔn)確度低,對農(nóng)yao藥的適用范圍窄。


樣品前處理及對照液、檢測樣品液的制備:

1) 對照液的制備:取酶100ul,蔬菜農(nóng)藥殘留檢測儀,緩沖液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻,再加入顯色劑100ul,底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑,放入儀器進行對照測試。

2) 檢測樣品液的制備:

a.取2g茶葉樣品放入三角瓶中,加入10ml緩沖液,快速農(nóng)藥殘留檢測儀, 振蕩提?。卜昼姾筮^濾,取出清液即為待測試液。

b.取酶100ul,待測試液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻靜置抑制10分鐘后,(按儀器顯示的時間計時)加入顯色劑 100ul,底物 20ul 。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑。