廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。NH2固相萃取柱供應(yīng)商

反向填充(C18,C8, HLB,NH2, CN, Phenyl)

*分析物：無極到中極性

母體：水溶性

·方法：

活化：通常在水溶性有1機(jī)溶1劑如甲1醇的作用下活化，然后與水平衡

淋洗：含0-50%極性溶劑的緩沖溶液對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行淋洗

(c)洗脫：用極性或非極性溶劑洗脫靶物

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為何 SPE小柱操作強(qiáng)調(diào)流速？

回答： SPE小柱填料充填壓實(shí)后，形成柱床，當(dāng)溶劑流過小柱時(shí)，速度過快會(huì)引起兩個(gè)問題：一是對(duì)于粘結(jié)相填料而言，由于流速過快，使其不能充分浸潤(rùn)舒展，從而使其保持活性降低；二是流速過快會(huì)使小柱形成溝槽，使其未充分浸潤(rùn)，從而降低吸附填料與樣品的接觸面積，影響目標(biāo)物質(zhì)的傳質(zhì)過程，從而降低回收率。當(dāng)柱流速度為0.5-3.0 mL/min時(shí)，通常不會(huì)產(chǎn)生溝槽效應(yīng)，且溝槽的形成與柱床高度有關(guān)；當(dāng)柱流速度為0-3.分析靶物的作用時(shí)間較長(zhǎng)，控制流速可保證良好的保留效果。

例如：2-萘胺為弱堿性化合物(pKa=4.16)，在一定 pH條件下可呈陽(yáng)離子化狀態(tài)，同時(shí)又具有疏水和親水基。此時(shí)可根據(jù)樣品基質(zhì)選擇有利于目標(biāo)物與干擾物分離的萃取機(jī)理。在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí)，可利用極性相互作用，選擇正相萃取方式；而在極性樣品環(huán)境下，則可采用反相萃取方式。采用陽(yáng)離子交換機(jī)制，可將萃取過程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位，即 pH=2.16。

保留性機(jī)理其一影響因素：物官能團(tuán)的性質(zhì)

保存性第二影響因素：樣品基體的特性

如何區(qū)：2-萘分中性氧化鋁、酸性氧化鋁、堿性氧化鋁？樣品

回答：Al2O3的主要作用力是通過金屬鋁中心和化合物的羥基之間的氫鍵或離子交換作用而吸附。pH (Al-N):6.5，中性氧化鋁主要通過鋁原子中心與具有高負(fù)電荷的雜原子發(fā)生作用，如： N, O, P, S和富電子的芳香族化合物

首先了解酸化和堿化后的氧化鋁，它的性質(zhì)變化如下：

A2O3 6 HCl=2AlCl3 3H2O；

A2 2 NaOH=2NaAlO2 (偏鋁酸鈉) H2O

酸氧化鋁和堿化氧化鋁使氧化鋁表面的電荷性發(fā)生變化，例如酸性氧化鋁帶正電荷的中心易吸附陰離子，并產(chǎn)生偶極作用，從而吸附極性化合物；而堿性則可吸附極性和含有陽(yáng)離子官能

在 pH和 pKa相同的情況下，[a]/[HA]為1。這就是說，此時(shí)50%弱酸性化合物是陰離子態(tài)，另50%為中性態(tài)。這種 pH環(huán)境下，即使這些呈陰離子狀態(tài)的化合物地被陰離子交換劑吸附，然后地洗脫，也只能得到50%的回收率。由于只有50%的弱酸化合物處于離子狀態(tài)，所以被陰離子交換劑吸附。因此，控制環(huán)境 pH值對(duì)于離子交換固相萃取非常重要。

較弱的酸性化合物離子化的程度越高，代表了較強(qiáng)的[A=[HA]。從理論上講，當(dāng)[A]/[HA]等于100時(shí)，99%的弱酸性化合物都是陰離子，并且能被陰離子交換劑吸附。按照式三，要使弱酸性化合物在陰離子固相萃取吸附時(shí)99%的離子化，樣品基質(zhì)的 pH值應(yīng)高于化合物 pKa至少兩個(gè) pH單位。相反，在對(duì)弱酸性化合物的洗脫過程中，環(huán)境中的 pH值應(yīng)調(diào)整到低于化合物 pKa的至少兩個(gè) pH單位以下，此時(shí)弱酸性化合物99%是中性狀態(tài)，用適當(dāng)?shù)娜軇年庪x子交換柱洗脫。

淋洗液如果是水，不進(jìn)行抽干，就會(huì)有一部分被收集到洗脫液中，洗脫液如果進(jìn)行氮吹，則含水的洗脫液也很難進(jìn)行抽干。

如果進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的氮吹，則少量的水溶液會(huì)被吹干，從而導(dǎo)致回收率較低的情況出現(xiàn)，因此淋洗后就需要進(jìn)行抽干操作。

洗脫后會(huì)有部分洗脫溶劑殘留在填料上，填料用量較大時(shí)，洗脫液甚至?xí)埩?~2毫升，使洗脫液不能完全回收，造成回收率低、平行性差。

為確保洗脫的溶劑和目標(biāo)物得到充分回收，還需要對(duì)其進(jìn)行脫水。

廣州碩譜生物科技有限公司，反相SPE柱，是目前國(guó)內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。NH2固相萃取柱供應(yīng)商

一般來說，我們需要分離的混合物的性質(zhì)各不相同，很難通過調(diào)整 PH來達(dá)到要求。一般而言，在改變流動(dòng)相 PH的基礎(chǔ)上，又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數(shù)C18反相分離柱在使用

一、強(qiáng)酸淋洗、強(qiáng)堿

用硅膠作載體的粘結(jié)相填料，其使用要求是：流動(dòng)相 PH值在2.5-7.5之間。在 PH<2時(shí)，流動(dòng)相可能與載體硅膠和合相發(fā)生水解反應(yīng)，從而導(dǎo)致碳鏈損失；在 PH<7時(shí)，流動(dòng)相可能使載體硅膠溶解。因此，硅膠基體C18 (即 ODS)在強(qiáng)堿條件下基本壽命較短，聚合體C18雖然能在高堿性條件下穩(wěn)定工作，但其價(jià)格昂貴，分離性能及模組強(qiáng)度均不如 ODS。

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改進(jìn)凈化方式

在一般情況下，目標(biāo)化合物模式比雜質(zhì)模式的凈化效果要好，如果要分析的是某種特定種類的化合物，則較好是用保留目標(biāo)化合物的模式來分析；舉一個(gè)簡(jiǎn)單的例子，也就是對(duì)蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類堿性農(nóng)1藥)進(jìn)行分析，用陽(yáng)離子交換柱可專一性地保留這些農(nóng)1藥，使其與干擾物基本完全分離，而用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物，保留干擾物的數(shù)量較多。

此外，如果可以用多個(gè) SPE柱對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行凈化，應(yīng)選擇選擇性好的吸附劑；選擇性越高，離子交換>正相>反相。