本試劑盒用于體外定量檢測、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中兔骨堿性磷酸酶（BALP）的含量。

有效期：6個(gè)月

保存條件：2-8℃

實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被兔骨堿性磷酸酶（BALP）捕獲的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔骨堿性磷酸酶（BALP）呈正相關(guān)。用在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

保存方式編輯室溫。低溫保存可能會(huì)有沉淀析出。如果發(fā)生析出現(xiàn)象，請(qǐng)于50℃溶解后，再于室溫保存。操作方法編輯全套操作約需1小時(shí)，分勻漿、細(xì)胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟，詳細(xì)說明如下。勻漿和細(xì)胞裂解:使用不同的實(shí)驗(yàn)材料需采用不同的勻漿步驟，具體說明如下：【從動(dòng)物組織中提取基因組DNA】使用研缽進(jìn)行勻漿時(shí)：① 取1～100 mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中，快速用力展研成勻漿。注）下列組織請(qǐng)加液氮研磨至粉末狀。



植物材料種類植物材料使用量*植物花、葉片10～100 mg植物莖60～240 mg植物根80～240 mg植物種子80～240 mg* 如選取植物的根、種子等樣品時(shí)，因其基因組DNA含量很低，需使用超過表格中所示的參數(shù)用量，此時(shí)請(qǐng)分兩管進(jìn)行步驟1～6的實(shí)驗(yàn)操作，在步驟7的操作中再將各管溶液分次加入至同一Spin Column中過濾，使各管的基因組DNA結(jié)合到同一個(gè)Spin Column上。



如從培養(yǎng)的植物細(xì)胞中提取基因組DNA，請(qǐng)離心收集2×103～1×107的培養(yǎng)植物細(xì)胞，加入150 μl水充分懸浮細(xì)胞后移入研缽中，加入液氮后快速、用力研磨至粉末狀。注）樣品研磨應(yīng)充分，否則將會(huì)嚴(yán)重影響基因組DNA的收率。② 將研缽移至65℃水浴，當(dāng)樣品粉末剛開始融化時(shí)，向研缽中加入700 μl的Solution A和1.2 μl的RNase A1，用力碾磨30秒。③ 收集650 μl研磨好的組織勻漿移至Collection Tube中。如勻漿體積不足650 μl，請(qǐng)補(bǔ)充Solution A至650 μl。65℃保溫15分鐘。注）處理富含纖維的根/莖等植物材料或富含淀粉、蛋白質(zhì)的種子等時(shí)，可延長水浴時(shí)間至60分鐘。