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發(fā)布時間:2021-08-07 07:03  
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磁性微球能與蛋白質(zhì)產(chǎn)生表面吸附作用,具有一定的相容性,它能使蛋白質(zhì)純化而又不改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),并且磁性微球純化蛋白質(zhì)不受溫度的影響,但是隨著時間的延長、pH值的升高,吸附量會有所降低。
細(xì)胞分離與標(biāo)記:利用磁性微球進(jìn)行細(xì)胞分離的一般過程是,將抗細(xì)胞表面特異性包被磁球表面,與細(xì)胞原液混合孵育、磁分離,然后用適當(dāng)方法解離,并將磁球分離出來,得到純凈的細(xì)胞。磁性微球在應(yīng)用于細(xì)胞分離時,通過選擇表面特異性的不同,既可以用于分離不需要的細(xì)胞,也可用于富集所需要的細(xì)胞。
加熱固化法系指利用蛋白質(zhì)受熱凝固的性質(zhì),在100~180℃的條件下加熱使乳劑的內(nèi)向固化、分離制備微球的方法。常用的載體材料為白蛋白,必須是水溶性的。常將與25%白蛋白水溶液混合.加到含適量乳化劑的油相(如棉籽油)中,制成油包水的初乳,另取適量油加熱至100-180℃.控制攪拌速度將初乳加入熱油中,約維持20分鐘,使白蛋白乳滴固化成球,用適宜溶劑洗滌除去附著的油,過濾、干燥即得。
微球制劑的細(xì)菌內(nèi)和無菌檢查,需要進(jìn)行球內(nèi)和球外部檢測實(shí)驗。微球外部實(shí)驗,旨在檢測制劑完成生產(chǎn)灌裝入瓶中時的微生物和細(xì)菌內(nèi);微球內(nèi)部實(shí)驗,旨在檢測微球內(nèi)部包含的微生物和細(xì)菌內(nèi)。微球的粒徑遠(yuǎn)大于真菌和細(xì)菌,因此表面及內(nèi)部均存在污染可能??刹捎弥苯咏臃N法對利培酮微球內(nèi)部和外部進(jìn)行無菌檢查,在內(nèi)部無菌檢查過程中,先用2mL二亞砜將微球溶解和破碎,將溶解后全部液體接種至20mL培養(yǎng)基中,運(yùn)用顯微鏡觀察溶解和培養(yǎng)過程。這種內(nèi)部檢查方法經(jīng)方法學(xué)驗證表明各驗證菌生長情況良好,使用濃度小于10%的二亞砜不會影響微生物的生長,可應(yīng)用于微球制劑的無菌檢查。