低溫生物的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量：保藏的應(yīng)培養(yǎng)在營(yíng)養(yǎng)豐富的條件下，使之進(jìn)入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對(duì)環(huán)境抵抗力強(qiáng)。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對(duì)冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高，就會(huì)使以后傳種造成困難，保存期也會(huì)受到影響。

保護(hù)劑：不同種類(lèi)的保護(hù)劑對(duì)不同微生物的作用是不同的，如個(gè)別在脫脂乳作保護(hù)劑的情況下失敗率高達(dá)99.99%，而采用葡聚糖等混和保護(hù)劑時(shí)失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的對(duì)保護(hù)劑的要求不很?chē)?yán)格，而不易保存的對(duì)保護(hù)劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護(hù)劑是冷凍干燥保存的關(guān)鍵因素。

干燥速度：實(shí)驗(yàn)表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對(duì)細(xì)菌細(xì)胞影響較大，可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而失敗，故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封，才有利于長(zhǎng)期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒(méi)有上述幾項(xiàng)因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過(guò)高對(duì)菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

低溫生物的冷凍干燥保藏法

(1)準(zhǔn)備安瓿管用于冷凍干燥保藏的安瓿管宜采用中性玻璃制造，形狀可用長(zhǎng)頸球形底的，亦稱(chēng)淚滴型安瓿管(圖Ⅶ-15)，大小要求外徑6-7.5mm，長(zhǎng)105mm，球部直徑9-11mm，壁厚0.6-1.2mm。也可用沒(méi)有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞，1.05kg/cm2>，121.3℃滅菌30分鐘，備用。

(2)準(zhǔn)備，用冷凍干燥法保藏的，其保藏期可達(dá)數(shù)年至十?dāng)?shù)年，為了在許多年后不出差錯(cuò)，故所用要特別注意其純度，即不能有雜菌污染，然后在適培養(yǎng)基中用適溫度培養(yǎng)，使培養(yǎng)出良好的培養(yǎng)物。細(xì)菌和酵母的菌齡要求超過(guò)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，若用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的進(jìn)行保藏，其存活率反而降低。一般，細(xì)菌要求24-48小時(shí)的培養(yǎng)物;酵母需培養(yǎng)3天;形成孢子的微生物則宜保存孢子;線菌與絲狀真菌則培養(yǎng)7-10天。

(3)制備菌懸液與分裝以細(xì)菌斜面為例，用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中，制成濃菌液，每支安瓿管分裝0.2ml。

(4)冷凍冷凍干燥器有成套的裝置出售，價(jià)值昂貴，此處介紹的是簡(jiǎn)易方法與裝置，可達(dá)到同樣的目的。

將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍，無(wú)低溫冰箱可用冷凍劑如干冰(固體CO2>)酒精的液或干冰酮液，溫度可達(dá)-70℃。將安瓿管插入冷凍劑，只需冷凍4-5分鐘，即可使懸液結(jié)冰。

申請(qǐng)時(shí)，有新的低溫生物的必須要辦理保藏嗎？

如果得到了審批權(quán)人卻沒(méi)有構(gòu)成的新要件，顯而易見(jiàn)是需要保藏的。發(fā)酵飼料原料與配方:配制好的發(fā)酵飼料1000公斤，水350-400公斤(夏天350，冬天400)，飼料發(fā)酵劑5公斤,100-200克納豆菌。 制作稀釋活化發(fā)酵液:將5公斤飼料發(fā)酵劑和100-200克納豆菌倒入350-400公斤水中攪拌均勻制成活化發(fā)酵液。 將制成的活化發(fā)酵液與1000公斤發(fā)酵飼料混合均勻，濕度以手捏成團(tuán)不滴水，一觸即散為宜。有攪拌機(jī)的大型養(yǎng)殖場(chǎng)將活化發(fā)酵液慢慢加入飼料中攪拌均勻即可;沒(méi)有攪拌機(jī)的養(yǎng)殖戶將活化發(fā)酵液慢慢少量噴到飼料上，用鐵鍬攪拌均勻，注意:不能有團(tuán)塊、水結(jié)塊，用手將團(tuán)塊、水結(jié)塊搓散攪拌均勻。 大型養(yǎng)殖場(chǎng)可以將配置好的飼料在地面壓實(shí)堆成垛或者裝入水泥池壓實(shí)，用塑料薄膜密封或者使用厚實(shí)的不透氣的塑料碎團(tuán)塊、水結(jié)塊。