熒光光譜

物體經(jīng)過較短波長的光照，把能量儲存起來，然后緩慢放出較長波長的光，放出的這種光就叫熒光。如果把熒光的能量--波長關(guān)系圖作出來，那么這個(gè)關(guān)系圖就是熒光光譜。熒光光譜當(dāng)然要靠光譜檢測才能獲得。

熒光光譜。高強(qiáng)度激光能夠使吸收物質(zhì)中相當(dāng)數(shù)量的分子提升到激發(fā)態(tài)。因此極大地提高了熒光光譜的靈敏度。以激光為光源的熒光光譜適用于超低濃度樣品的檢測，例如用氮分子激光泵浦的可調(diào)染料激光器對熒光素鈉的單脈沖檢測限已達(dá)到10-10摩爾/升，比用普通光源得到的靈敏度提高了一個(gè)數(shù)量級。

熒光光譜有很多，如原子光譜1905年，Wood首先報(bào)道了用含有NaCl的火焰來激發(fā)盛有鈉蒸氣的玻璃管，并得到了D線的熒光，被Wood稱為共振熒光。在Mitchell及 Zemansky和Pringsheim的著作里討論了某些揮發(fā)性元素的原子熒光?；鹧嬷械脑訜晒鈩t是Nichols和Howes于1923年報(bào)道的，他們在Bunsen焰中做了Ca、Sr、Ba、Li及Na的原子熒光測定。從1956年開始，Alkenmade利用原子熒光效率和原子熒光輻射強(qiáng)度的測定方法，以及用于測量不同火焰中鈉D雙線共陣熒光效率的裝置，預(yù)言原子熒光可用于化學(xué)分析。 1964年，美國的Winefordner和Vickers提出并論證了原子熒光火焰光譜法可作為一種新的分析方法，同年，Winefordner等成功地用原子熒光光譜測定了Zn、Cd、Hg。有色散原子熒光儀和無色散原子熒光儀的商品化，極大動了原子熒光分析的應(yīng)用和發(fā)展，使其進(jìn)入一個(gè)快速發(fā)展時(shí)期。

什么是熒光光譜？

任何熒光化合物都具有兩個(gè)特征光譜：激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。激發(fā)光譜反映了某一固定的發(fā)射波長下所測量的熒光強(qiáng)度對激發(fā)波長的依賴關(guān)系；發(fā)射光譜反映了某一固定激發(fā)波長下所測量的熒光的波長分布。

熒光光譜能夠提供激發(fā)譜、發(fā)射譜、峰位、峰強(qiáng)度、產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振度等信息，熒光分析定性和定量的基礎(chǔ)。

熒光光譜的特點(diǎn)：（1）Stokes位移。激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間有波長差，發(fā)射光譜波長比激發(fā)光譜波長長；（2）發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān)；（3）鏡像規(guī)則，熒光發(fā)射光譜與它的吸收光譜成鏡像對稱關(guān)系。

熒光光譜定量分析

在低濃度時(shí)，溶液的熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比：F=Kc。其中，F(xiàn)為熒光強(qiáng)度，c為熒光物質(zhì)濃度，K為比例系數(shù)。這就是熒光光譜定量分析的依據(jù)。

上述關(guān)系不適用于熒光物質(zhì)濃度過高時(shí)，熒光物質(zhì)濃度過高，其熒光強(qiáng)度反而降低。原因有：

（1）內(nèi)濾效應(yīng)。一是，當(dāng)溶液濃度過高時(shí)，溶液中雜質(zhì)對入射光的吸收作用增大，相當(dāng)于降低了激發(fā)光的強(qiáng)度。二是，濃度過高時(shí)，入射光被液池前部的熒光物質(zhì)強(qiáng)烈吸收，處于液池中、后部的熒光物質(zhì)，則因受到入射光大大減弱而使熒光強(qiáng)度大大降低；而儀器的探測窗口通常對準(zhǔn)液池中部，從而導(dǎo)致檢測到的熒光強(qiáng)度大大降低。

（2）相互作用。較高濃度溶液中，可發(fā)生溶質(zhì)間的相互作用，產(chǎn)生熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子與其基態(tài)分子的二聚物或其他溶質(zhì)分子的復(fù)合物，從而導(dǎo)致熒光光譜的改變和/或熒光強(qiáng)度下降。當(dāng)濃度更大時(shí)，甚至?xí)纬蔁晒馕镔|(zhì)的基態(tài)分子聚集體，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度更嚴(yán)重下降。

（3）自淬滅。熒光物質(zhì)的發(fā)射光譜與其吸收光譜呈現(xiàn)重疊，便可能發(fā)生所發(fā)射的熒光被部分再吸收的現(xiàn)象，導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。溶液濃度增大時(shí)會促使再吸收現(xiàn)象加劇。

當(dāng)然，熒光強(qiáng)度的影響因素還有溶劑、溫度、pH值、散射光等，在定量分析中需要加以考慮。

熒光光譜定量分析的計(jì)算與其他光譜類似，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比例法等。

熒光的主要用途與指標(biāo)

主要用途

1.熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜

2.同步熒光（波長和能量）掃描光譜

3.3D（Ex Em Intensity)

4.Time base和CWA(固定波長單點(diǎn)測量）

5.熒光壽命測量，包括壽命分辨及時(shí)間分辨

6.計(jì)算機(jī)采集光譜數(shù)據(jù)和處理數(shù)據(jù)（Datamax和Gram32)

類別 指標(biāo)

儀器類別： 03030429 /儀器儀表 /成份分析儀器 /X熒光譜儀

指標(biāo)信息：

激發(fā)光源 Xe 450W

激發(fā)單色儀：4nm/mm,200nm～700nm

發(fā)射單色儀：雙色單儀，2nm/mm,300～1000nm

光譜測量范圍：240nm～850nm

靈敏度：水喇曼信噪比4000：1（397nm/5nm bandpass)

壽命響應(yīng)范圍：10ps～10μs