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發(fā)布時間:2021-06-23 09:37  
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原位雜交技術(shù)可應(yīng)用于什么方面
1.細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位 可用于基因圖譜、基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究。
2.感6染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類乳3頭狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測。
3.癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測。
4.基因在染色體上的定位。
5.檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等。
6.分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳
原位雜交中探針的選擇
DNA探針、RNA探針和寡核苷酸探針均能通過不同的酶促分子反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記。寡核苷酸探針的長度較短,因此避免了探針內(nèi)部退火的問題,在雜交時的滲透能力也更好,探針與靶標(biāo)的接觸這是影響原位雜交是否成功的重要因素之一。DNA探針、RNA探針在合成時需要控制探針片段長度,通常300-1000bp左右,能覆蓋到較長片段的靶核酸序列,增加檢測的靈敏度。
多彩色熒光原位雜交技術(shù):顯而易見,是熒光原位雜交的升級版,采用多個熒光來檢測,目前的發(fā)展及運用也是較多的。
原位PCR:將原位雜交結(jié)合PCR技術(shù)發(fā)展起來的實驗方法。
基因組原位雜交技術(shù):該技術(shù)在我們的領(lǐng)域可能運用的畢竟少,主要是根據(jù)物種DNA同源性差異實現(xiàn),在農(nóng)作物等的雜交育種上運用較廣,
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
根據(jù)不同的雜交實驗要求,應(yīng)選擇不同的核酸探針。在大多數(shù)情況下,可以選擇克0隆的DNA或cDNA雙鏈探針。但是在有些情況下,必須選用其它類型的探針如寡核苷酸探針和RNA探針。例如,在檢測靶序列上的單個堿基改變時應(yīng)選用寡核苷酸探針,在檢測單鏈靶序列時應(yīng)選用與其互補(bǔ)的DNA單鏈探針(通過克0隆人M13噬菌體DNA獲得)或RNA探針,寡核苷酸探針也可。長的雙鏈DNA探針特異性較強(qiáng),適宜檢測復(fù)雜的靶核苷酸序列和病原體 ,但不適宜于組織原位雜交,因為它不易透過細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)或核內(nèi)。在這種情況下,寡核苷酸探針和短的PCR標(biāo)記探針(80~150bp)具有較大的優(yōu)越性。